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背景具有相同TNM分期的食管癌患者,其肿瘤发生转移的时间相差悬殊,miR-212高表达与肿瘤转移早、患者生存期短有密切相关性。为了从细胞分子水平解释食管癌的这种转移易感性,我们首先通过miR-212慢病毒转染食管鳞癌细胞,然后利用MTT和Transwell迁移/侵袭实验分别检测过表达miR-212对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。其次,阐明miR-212是通过调控EMT过程、增加ECM降解酶的表达来促进食管鳞癌细胞迁移。最后给予盐酸小檗碱处理后能够抑制miR-212介导的食管鳞癌的细胞迁移。因此,miR-212能够作为食管鳞状细胞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC)的预后指标和治疗靶点,而盐酸小檗碱作为一种潜在的治疗药物,能够用于预防高miR-212表达的ESCC患者的肿瘤转移。目的阐明miR-212与食管鳞癌细胞生长及迁移的相关性,为食管癌的预后判断提供新的生物标记物,并为临床的诊断治疗提供理论基础。方法选用ESCC的三种细胞系,即KYSE-450、TE-1和Eca109。首先,通过慢病毒转染技术使食管鳞癌细胞系过表达miR-212;利用MTT法测定miR-212对细胞增殖的影响;利用Transwell迁移/侵袭实验来检测过表达miR-212对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响;其次,通过Western blot法检测与上皮-间质转化相关的多种蛋白的表达水平,以及细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)降解酶,如MMP2、MMP9和uPA的蛋白表达水平。最后,通过给予盐酸小檗碱处理,检测其对miR-212过表达的食管鳞癌细胞迁移能力的影响。结果miR-212过表达不影响食管鳞癌细胞增殖能力,但是显著促进其迁移和侵袭能力;Western blot结果表明,过表达miR-212可以降低EMT相关蛋白如E-cadherin的表达水平,同时增加β-catenin,Vimentin和转录因子Twist1的蛋白表达水平,同时增加了MMP9和uPA的蛋白表达水平。另外,虽然多种化学药物或抑制剂在其他类型的癌细胞中显示出抗肿瘤功能,但在食管鳞癌细胞中对miR-212诱导的细胞表型没有显著影响;而盐酸小檗碱呈浓度依赖性抑制miR-212诱导的人食管癌KYSE-450细胞的迁移能力,并对EMT过程表现出抑制作用,其作用机制可能是通过抑制食管上皮-间质转化及抑制转录因子Twist1的表达。结论miR-212通过调控食管鳞癌细胞的EMT相关蛋白及ECM降解酶的表达,促进食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力,但不影响其增殖能力。盐酸小檗碱能够抑制miR-212诱导的食管鳞癌细胞的迁移能力。总之,miR-212可能作为ESCC患者的预后指标和治疗靶点,盐酸小檗碱作为一种潜在的治疗药物,可以有效抑制miR-212高表达的ESCC患者的肿瘤转移。