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本研究旨在构建具长循环、主动靶向、还原和p H敏感释药等功能于一体的聚合物释药系统。首先以4代的聚酰胺-胺树状大分子(Polyamidoamine dendrimer,PAMAM)为聚合物骨架材料,通过二硫键将聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)连接在PAMAM的表面,合成不同PEG化程度的PAMAM-SS-PEG(PSSP)聚合物,然后以阿霉素(Doxorubicin,DOX)为抗肿瘤模型药物制备了PAMAM-SS-PEG/DOX(PSSP/DOX)复合物。通过考察不同聚合物对载药系统体内外活性的影响,优选出PEG化程度最佳的聚合物PSSP32作进一步研究。为了进一步提高PSSP32聚合物的主动靶向作用,增强其抗肿瘤活性,采用双功能化的HS-PEG5000-COOH偶联c RGDy K多肽和PAMAM,合成RGD-PEG-SS-PEG-PAMAM(RGD-PSSP)聚合物,并在此基础上制备了RGD-PEG-SS-PEG-PAMAM/DOX(RGD-PSSP/DOX)复合物。随后对复合物的制剂学特性、细胞毒性、细胞摄取、摄取机制以及荷瘤小鼠的体内抗肿瘤活性进行了研究。首先,以4代PAMAM、SPDP和CH3O-PEG5000-HS为起始材料合成了三种不同PEG化程度的PSSP聚合物,分别称为PSSP8、PSSP16和PSSP32。通过TLC、1H NMR和FTIR对聚合物进行了结构确证,同时测定了三种聚合物的粒径和Zeta电位值,并在体外考察了聚合物的还原敏感性、溶血毒性及在血清中的稳定性。此外,采用荧光显微镜和流式细胞术考察RAW264.7巨噬细胞对聚合物的摄取情况,结果表明经过PEG化修饰后的PSSP聚合物能显著减少被RAW264.7细胞的摄取,有助于延长在血液中的滞留时间,实现对肿瘤的被动靶向作用。最后,以异硫氰酸盐罗丹明B(RBITC)为荧光探针,通过共聚焦显微镜(CLSM)考察了PSSP聚合物在胞内转运情况,结果表明聚合物进入细胞后主要分布在细胞质和溶酶体中,并能从溶酶体中逃逸出来进入细胞质中,从而在高浓度谷胱甘肽(GSH)的刺激下发生二硫键断裂,迅速释放其包载的药物。其次,以DOX作为抗肿瘤模型药物,通过疏水作用制备了三种不同PEG化程度的PSSP/DOX复合物,并对其制剂学性质进行了评价。结果表明复合物具有较高的包封率,载药量在10%左右,载药前后其粒径和Zeta电位均未发生明显变化。体外释放结果表明,PSSP/DOX复合物具有明显的还原和p H敏感性,并且DOX的释放程度随着PEG化程度的增加而增加。再次,以B16和A549细胞作为肿瘤细胞模型,分别对PSSP/DOX复合物的细胞毒性,细胞摄取及胞内的药物分布情况进行了考察。结果表明复合物的细胞毒性随着PEG化程度增加而增加,但细胞摄取却随着PEG化程度增加而减少,结合体外释放、细胞毒性实验及胞内药物分布情况,证实了细胞内的药物释放是决定细胞毒性的关键因素。通过多种内吞抑制剂来考察PSSP/DOX复合物的摄取机理,结果表明复合物是通过网格蛋白介导的内吞途径和小窝蛋白介导的内吞途径进入细胞。此外,通过酸性抑制剂氯喹和GSH抑制剂马来酸二乙酯(DEM)来进一步考察PSSP/DOX复合物的细胞毒作用,结果表明两种抑制剂分别能抑制细胞内的酸性环境和还原环境,从而导致复合物的细胞毒作用减弱。这也进一步证实了复合物是通过网格蛋白介导的内吞途径和小窝蛋白介导的内吞途径进入细胞,从而在细胞内两种不同的环境中释放药物。以B16荷瘤小鼠为肿瘤动物模型,考察了PSSP/DOX复合物在小鼠体内的抗肿瘤作用,结果表明该复合物能明显抑制肿瘤的生长,并且能显著降低DOX对小鼠的毒副作用。最后,采用双功能化的HS-PEG5000-COOH在PSSP聚合物上偶联c RGDy K多肽合成RGD-PSSP聚合物,在此基础上制备RGD-PSSP/DOX复合物并对其体内外活性进行评价。体外释放结果表明,RGD-PSSP/DOX复合物的释放行为具有明显的还原和p H敏感性,与PSSP/DOX相比,连接上RGD后对释放无明显影响。以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为肿瘤新生血管内皮细胞模型,同时以B16细胞作为肿瘤细胞模型,对RGD-PSSP/DOX复合物的细胞毒性、细胞摄取及摄取机理进行考察。细胞毒性结果显示连接上RGD后显著增加了RGD-PSSP/DOX复合物对两种细胞的细胞毒性。细胞摄取及摄取机理研究表明,RGD-PSSP/DOX主要通过RGD多肽与细胞表面高表达的整合素αvβ3受体特异性的相互识别来与细胞接触,然后通过网格蛋白介导的内吞和细胞膜穴样内陷介导的内吞两种方式被细胞摄取。B16荷瘤小鼠的体内抗肿瘤实验结果表明,RGD-PSSP/DOX具有比PSSP/DOX更好的体内抗肿瘤效果,而且能显著降低DOX对小鼠的毒性。同时,肿瘤和各组织病理切片的HE染色结果表明,RGD-PSSP/DOX相对于DOX溶液组表现出良好的安全性,无明显的心脏毒性和肾脏毒性,对其他正常器官也几乎无明显损伤。