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目的:通过细胞跨膜迁移实验和采用特异性阻断剂,探讨VEGF-A165、VEGF-C、整合素β1亚基在卵巢癌细胞(OV-420)迁移过程中的作用,为进一步研究VEGF-A165、VEGF-C和整合素β1亚基在肿瘤转移中的作用提供新思路。
方法:采用上下两室被PET膜隔开的细胞培养池(Transwell)培养卵巢癌OV-420细胞和人血管内皮细胞(HUEVC);培养液中加入VEGF-A165检测其不同浓度和不同时间对卵巢癌OV-420细胞迁移的影响;培养液中应用整合素α9β1特异性抗体Y9A2作用于OV-420细胞,在一定时间检测人血管内皮细胞对OV-420细胞迁移量的影响;应用整合素α9β1特异性抗体Y9A2作用OV-420细胞一定时间,采用蛋白印记技术(Western Blot)检测VEGF-C的表达。
结果:滴加浓度为1.667ng/ml人VEGF-A165于OV-420的培养液中,OV-420迁移PET膜下表面的细胞较不加VEGF-A165(对照组)迁移的细胞数增多(P<0.05);但人VEGF-A165浓度在1.667~13.333ng/ml范围内逐渐提高时,迁移的OV-420细胞数却逐渐减少;滴加人VEGF-A165(64.5ng/ml)组迁移细胞数不随时间的延长而增加(P<0.05):Y9A2阻断整合素β1亚基组人血管内皮细胞对OV-420迁移细胞数较空白对照组明显增多(P<0.05):Y9A2(0.214%)阻断OV-420的整合素β1亚基细胞30小时,VEGF-C的表达量较空白对照组明显增多(P<0.05)。
结论:适当浓度的人VEGF-A165对卵巢癌细胞OV-420具有趋化作用;高浓度人VEGF-A165可能抑制OV-420迁移;阻断整合素β1亚基可促进OV-420细胞向人血管内皮细胞迁移;阻断整合素β1亚基30小时,促进OV-420细胞VEGF-C的表达。