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目的:观察外源性钙卫蛋白(S100A8/A9,Calprotectin)对口腔鳞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)细胞迁移能力和侵袭能力的影响,并探求潜在的相关机制,为S100A8/A9蛋白在口腔鳞癌细胞侵袭转移相关机制研究提供实验依据。方法:(1)采用CCK 8法检测不同浓度的S100A8/A9蛋白对SCC-25及CAL-27细胞增殖能力的影响,确定合适浓度;(2)以添加外源性1ug/ml S100A8/A9蛋白复合物的组别为实验组,不含有S100A8/A9蛋白复合物的组别为对照组,采用划痕实验、Transwell小室迁移实验和Transwell小室侵袭实验检测SCC-25及CAL-27细胞的迁移及侵袭的情况;(3)添加外源性1ug/ml S100A8/A9蛋白培养OSCC细胞,分别在不同时间点收取SCC-25及CAL-27细胞的总蛋白,采用Western blot检测细胞中p38MAPK信号通路表达情况;(4)采用免疫荧光法检测1ug/ml S100A8/A9蛋白处理SCC-25及CAL-27细胞后,细胞中p38MAPK信号通路表达情况;(5)添加p38MAPK信号通路抑制剂处理SCC-25及CAL-27细胞后,采用Transwell实验比较抑制剂组(p38MAPK通路抑制剂SB230580)与对照组和实验组的侵袭迁移能力影响,并通过RT-q PCR检测侵袭迁移关键标志物基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9基因的表达情况。结果:(1)CCK 8实验结果显示,SCC-25及CAL-27细胞增殖活性呈浓度依赖性(P<0.05);(2)划痕实验结果显示,1ug/ml S100A8/A9蛋白作用下的SCC-25及CAL-27细胞迁移能力增强(P<0.05);Transwell小室实验结果显示,1ug/ml S100A8/A9蛋白作用下的SCC-25及CAL-27细胞实验组与对照组比较,穿过聚碳酸酯膜的SCC-25及CAL-27细胞数量多,迁移侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.001)。(3)Western blot检测1ug/ml S100A8/A9蛋白对p38MAPK通路的影响,结果显示,p38MAPK通路存在激活现象,p-p38MAPK蛋白量在SCC-25及CAL-27细胞中累积增加。SCC-25及CAL-27细胞中p-p38MAPK蛋白在0.5h开始出现明显上调,12h后开始下调(p<0.05);(4)免疫荧光法结果显示,SCC-25及CAL-27细胞中观察到p-p38MAPK表达量变化,SCC-25及CAL-27细胞中p-p38MAPK蛋白在0.5h表达量增加,12h表达量降低(p<0.05)。(5)10μM SB230580处理SCC-25及CAL-27细胞后,Transwell迁移和侵袭实验显示,与实验组和对照组比较,穿过聚碳酸酯膜的SCC-25及CAL-27细胞数量减少,提示SCC-25及CAL-27细胞的迁移能力和侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P<0.001),RT-q PCR检测MMP-2及MMP-9基因结果显示,1ug/ml S100A8/A9蛋白作用下,实验组SCC-25及CAL-27细胞MMP-2及MMP-9基因表达上调,抑制剂组SCC-25及CAL-27细胞MMP-2及MMP-9基因表达下调,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:外源性S100A8/A9在SCC-25及CAL-27细胞中的作用具有浓度依赖性,低浓度S100A8/A9蛋白可能通过活化p38MAPK信号通路,促进OSCC细胞的迁移和侵袭。