自制压力泵在动脉粥样硬化闭塞症治疗中的应用性研究

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目的:本实验通过复制已成型的下肢动脉硬化闭塞症模型兔制作方法,制作兔下肢动脉硬化闭塞症模型,并进一步验证模型的成功率。在此基础上,再利用自制循环压力泵增加局部闭塞血管两端压力的特性,达到增加狭窄段血管血流量的效果,从而达到改善跛行症状,为临床上延缓甚至避免患者病情进一步发展创造条件。方法:第一部分实验:兔右下肢动脉硬化闭塞症模型的制作:30只体重2.53.5kg健康成年本地雄性兔,以高脂饲料每天300g/只的剂量对其进行喂养两天后,取右侧腹股沟下搏动明显处纵行切口,切口长约67cm,标记,常规消毒,铺巾后切开皮肤及肌肉组织,暴露股动脉,于无血管分支处,7号手术线绕动脉3周将其口径缩至约2/3(先将手术线绕动脉2周,标记,将标记的长度再环绕3周),以0号丝间断缝合皮肤及皮下组织,术后肌注青霉素20万U/只,第7d静脉注射牛血清白蛋白(250mg/kg),继续喂养高胆固醇饲料,共16周[1]。实验后观察实验兔存活情况,术后兔子的运动情况,术后进食情况,大便及小便的颜色及性状等指标;抽取造模前一周和造模后16周空腹血作血清血脂和纤维蛋白原测定, TXB2、6-Keto-PGF1α、ET-1、NO、ICAM-1测定结果,在16周时取一定数量的实验兔的右侧股动脉及右侧大腿肌肉组织做病理切片并观察。第二部分实验:自制压力泵对血液生化影响实验(体外泵血)及自制压力泵对实验兔泵血实验(体内泵血):将具有下肢动脉硬化闭塞症的24只实验兔,随机分为2组,分为实验组A、对照组B,每组12只,A组用自制压力泵对右下肢进行泵血,B组为自制压力泵未对右下肢股动脉进行泵血。取原纵行切口,切口长约6-7cm,常规消毒,铺巾后切开皮肤及肌肉组织,暴露股动脉,找到股动脉明显狭窄处(第一部分实验丝线环缩处),在此狭窄处上2cm处,以小号留置针穿刺股动脉,收取所需血液行生化检查。按照说明书要求安装压力泵,并装上特制硅胶橡皮管。在压力泵最大转速(150转/分)的条件下,在输出端收取所需血液行生化检查,关闭压力泵。利用输出段的小号留置针在输入端穿刺点下约1cm穿刺股动脉,以转速50转/分,启动压力泵,持续给实验兔泵血1小时。术后观察实验兔是否存活,术后实验兔的运动情况,术后进食情况,大便及小便的颜色以及性状等指标;体外泵血术前作ALT、AST、TBil、DBil、Cr、BUN、Na+、K+、Cl-、Ca2+、RBC、HGB、ESR;体外泵血术后Na+、K+、Cl-、Ca2+、RBC、HGB、ESR;体内泵血术后抽取兔动脉血作ALT、AST、TBil、DBil、Cr、BUN、Na+、K+、Cl-、Ca2+;平均容积流量与平均血流速度;右下肢远端皮肤温度;右下肢远端氧饱和度。结果:第一部分实验结果:(1)术后动物存活情况:死亡4只,一只为术后第2天表现打喷嚏、鼻腔分泌物增多,呼吸困难、急促而死,体温较高,解剖发现肺脏不均匀分布黄白色脓点;一只为术后进食量少、消瘦,在术后第4天死亡。一只为术后2天突然死亡,但经尸检未发现异常,原因不名;另一只在术后第2天开始腹泻,进食、进水量少,无发热,在术后第6天死亡;余26只动物均存活至术后16周;(2)在术前术后饮食饮水相同的情况下,发现存活动物术后12天进食量少,术后未见大小便颜色改变。(3)血生化指标:造模前后血脂和纤维蛋白原测定结果经两样本t检验存在统计学差异(P<0.05);(4)造模前后TXB2、6-Keto-PGF1α、ET-1、NO、ICAM-1测定结果经两样本t检验存在统计学差异;(5)术后病理切片可见股动脉斑块形成,肌肉组织可见肢体缺血、溃疡或坏死。第二部分实验结果:(1)动物存活情况:A组未死亡,但一只因手术时间长,恢复时间为4小时,其余均在2.5小时内恢复活动;B组均在术后2小时后恢复活动。(2)两组24只实验兔,体外泵血前后电解质、血常规、血沉等指标经两样本t检验,结果均无显著性差异(P>0.05);(3)A、B两组24只实验兔,体内泵血前后电解质、肝功能、肾功能等指标,经两样本t检验,结果均无显著性差异(P>0.05),而体内泵血后A、B两组平均容积流量与平均血流速度、右下肢远端皮肤温度、右下肢远端肢体血氧饱和度等指标,经两样本t检验,结果显示均具有统计学差异(P>0.05)。结论:(1)使用牛血清蛋白对血管内皮细胞进行免疫损伤,联合使用含有高脂肪高胆固醇的饲料饲养兔子以及轻度结扎股动脉可以制做成兔下肢动脉硬化闭塞症的动物模型;(2)此自制压力泵,在最大转速时,血液生化未受影响;(3)在一定的转速的范围内,自制压力泵对下肢动脉硬化症兔股动脉泵血,未造成缺血再灌注损伤;(4)此自制压力泵是一种有效的改善兔下肢动脉硬化闭塞症下肢动脉血液供应的方法。
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