胆红素对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响

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研究背景:肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的创伤愈合反应,是各种慢性肝病共有的病理基础。近年来研究发现,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)在肝纤维化中发挥关键作用,是肝纤维化时细胞外基质(ECM)的主要来源细胞,各种因素作用下引起肝损伤,通过旁分泌或自分泌释放多种细胞因子,使肝星状细胞激活,激活的HSC合成和分泌ECM增加。临床上,由血清胆红素升高(>17μmol/L)所引起的黄疸是临床多种急性、慢性肝病的常见症状。持续或反复的胆红素的升高,对肝脏疾病的预后具有重要的影响。因此迅速消退黄疸是临床控制病情、改善预后的治疗重点。然而,血清胆红素在肝纤维化发生发展过程中的作用机理如何,目前的相关研究还未阐明。本课题通过研究胆红素对大鼠肝星状细胞增殖及细胞周期的影响,初步探讨胆红素对肝纤维化形成中的可能机制。  目的:观察胆红素对大鼠HSC-T6细胞株增殖及细胞周期的影响,探讨胆红素在肝纤维化发展中的作用和作用机制。  方法:①将培养的细胞分为正常组、DMSO对照组和不同浓度的胆红素组(胆红素的终浓度为10umol/L、30umol/L、50umol/L、70umol/L、100umol/L),以MTT法观察胆红素对HSC-T6干预后的OD值,并且得出其增殖率;②将培养细胞分为正常组和胆红素不同浓度干预组(胆红素的终浓度为10umol/L、50umol/L、100umol/L),采用流式细胞仪观察各组细胞周期的变化。  结果:①MTT法检测显示:10umol/L、30umol/L、50umol/L、70umol/L、100umol/L胆红素均可以促进HSC-T6细胞的增殖,其增殖率分别为130%、157.5%、169%、177.8%、221.5%,且随药物浓度增加而增高,呈一定的量效关系。②流式细胞仪检测显示:经胆红素干预后,HSC-T6细胞增殖指数升高,与正常组比较有显著性差异(P<0.05),且呈一定的量效关系;细胞各周期中,胆红素作用于HSC-T6细胞后,G0/G1期减少,S期增加,G2/M增加,与正常组比较均有显著性差异( P<0.05)。  结论:胆红素在体外可较明显的促进HSC-T6的增殖,且呈一定的量效关系;说明胆红素在肝纤维化的发生发展的进程中有一定的促进作用。
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