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目的:糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)主要的微血管病变,本文通过观察肾消汤对DN的临床疗效及其对高糖诱导下的足细胞保护机制的研究,为肾消汤的临床运用及其可能的作用机理提供依据。
方法:
1.肾消汤联合雷公藤多苷片治疗Ⅳ-Ⅴ期DN的临床研究:54例DN患者在给予常规治疗基础上随机分为对照组27例和治疗组27例,对照组予以雷公藤多苷片,20mg,每天2次,治疗组在口服雷公藤多苷片的基础上加服肾消汤,1剂/日。两组均观察12周。比较两组改善中医症候积分、尿微量白蛋白(mAlb)、24h尿蛋白定量(24h-TP)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)、血β2-微球蛋白(β2-MG)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿足细胞特异性蛋白(PCX)、血清中SOD、MDA含量表达的实验室相关指标变化情况。
2.肾消汤对高糖诱导下人足细胞的保护作用:肾消汤含药血清与高糖诱导的足细胞共同培养,采用 CCK8法检测足细胞增殖率,分别用WST-1法和TBA法测定足细胞MDA含量、SOD活力;采用Western-blot及免疫组化法检测PCX蛋白表达水平。
结果:
1.肾消汤联合雷公藤多苷片治疗Ⅳ-Ⅴ期DN的临床研究:(1)证候积分比较:治疗组临床症状改善明显,有效率、证候积分与对照组比较,差异具有统计学意义;(2)疗效比较:使用肾消汤治疗Ⅳ-Ⅴ期DN,患者mAlb、24-TP、尿α1-MG、血β2-MG、Cr、BUN均有不同程度降低,且与服药时间成正相关性,且较对照组降低更显著,两组间比较有差异,说明肾消汤对DN的治疗疗效显著。在无调脂药干预下,治疗组TG、TC有显著下降,说明肾消汤又一定降脂功效;(3)治疗组尿PCX较前有不同程度的降低,且与 mAlb、24-TP的改善情况呈正相关,说明肾消汤可能是通过减少足细胞的损伤,尿 PCX的排泄减少,而使尿蛋白减少以保护肾脏;(4)治疗组血清中 SOD活力增高,MDA表达减少,说明肾消汤所用药物具有抑制氧化应激功效。
2.肾消汤对高糖诱导下人足细胞的影响:(1)采用细胞荧光技术检测足细胞Nephrin、PCX、WT-1的表达,结果证明该细胞为足细胞;(2)用CCK8法检测含药血清作用于高糖诱导的足细胞最适浓度30mmol/L,时间为48h;(3)含药血清作用于高糖诱导的足细胞,采用Western-blot法与免疫细胞化学法结果均显示:与正常组比较,高糖组PCX蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义,与高糖组比较,含药血清组PCX表达增多,差异具有统计学意义,同时增加足细胞内SOD活性,降低MDA含量,与临床试验结果具有一致性,证明肾消汤具有保护足细胞功效。
结论:肾消汤治疗Ⅳ-Ⅴ期DN患者疗效显著的症状,其临床指标和实验指标改善明显,与实验研究结果具有一致性,说明肾消汤可能通过减轻氧化应激反应,减轻足细胞的损伤,以对足细胞起到保护作用。从细胞生物学的基础上,阐述肾消汤对DN发挥功效可能的治疗机制。
方法:
1.肾消汤联合雷公藤多苷片治疗Ⅳ-Ⅴ期DN的临床研究:54例DN患者在给予常规治疗基础上随机分为对照组27例和治疗组27例,对照组予以雷公藤多苷片,20mg,每天2次,治疗组在口服雷公藤多苷片的基础上加服肾消汤,1剂/日。两组均观察12周。比较两组改善中医症候积分、尿微量白蛋白(mAlb)、24h尿蛋白定量(24h-TP)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)、血β2-微球蛋白(β2-MG)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿足细胞特异性蛋白(PCX)、血清中SOD、MDA含量表达的实验室相关指标变化情况。
2.肾消汤对高糖诱导下人足细胞的保护作用:肾消汤含药血清与高糖诱导的足细胞共同培养,采用 CCK8法检测足细胞增殖率,分别用WST-1法和TBA法测定足细胞MDA含量、SOD活力;采用Western-blot及免疫组化法检测PCX蛋白表达水平。
结果:
1.肾消汤联合雷公藤多苷片治疗Ⅳ-Ⅴ期DN的临床研究:(1)证候积分比较:治疗组临床症状改善明显,有效率、证候积分与对照组比较,差异具有统计学意义;(2)疗效比较:使用肾消汤治疗Ⅳ-Ⅴ期DN,患者mAlb、24-TP、尿α1-MG、血β2-MG、Cr、BUN均有不同程度降低,且与服药时间成正相关性,且较对照组降低更显著,两组间比较有差异,说明肾消汤对DN的治疗疗效显著。在无调脂药干预下,治疗组TG、TC有显著下降,说明肾消汤又一定降脂功效;(3)治疗组尿PCX较前有不同程度的降低,且与 mAlb、24-TP的改善情况呈正相关,说明肾消汤可能是通过减少足细胞的损伤,尿 PCX的排泄减少,而使尿蛋白减少以保护肾脏;(4)治疗组血清中 SOD活力增高,MDA表达减少,说明肾消汤所用药物具有抑制氧化应激功效。
2.肾消汤对高糖诱导下人足细胞的影响:(1)采用细胞荧光技术检测足细胞Nephrin、PCX、WT-1的表达,结果证明该细胞为足细胞;(2)用CCK8法检测含药血清作用于高糖诱导的足细胞最适浓度30mmol/L,时间为48h;(3)含药血清作用于高糖诱导的足细胞,采用Western-blot法与免疫细胞化学法结果均显示:与正常组比较,高糖组PCX蛋白表达水平降低,差异具有统计学意义,与高糖组比较,含药血清组PCX表达增多,差异具有统计学意义,同时增加足细胞内SOD活性,降低MDA含量,与临床试验结果具有一致性,证明肾消汤具有保护足细胞功效。
结论:肾消汤治疗Ⅳ-Ⅴ期DN患者疗效显著的症状,其临床指标和实验指标改善明显,与实验研究结果具有一致性,说明肾消汤可能通过减轻氧化应激反应,减轻足细胞的损伤,以对足细胞起到保护作用。从细胞生物学的基础上,阐述肾消汤对DN发挥功效可能的治疗机制。