壬基酚（Nonylphenol,NP）是一类具有强烈亲酯性的环境激素,一旦进入体内,会干扰动物正常的内分泌生理作用,进而对动物产生毒害作用。海洋双壳贝类如栉孔扇贝,长牡蛎是我国乃至世界重要的养殖经济品种。然而近些年,养殖贝类面临大规模死亡的严重威胁。研究显示,环境因素（如高温,低氧等）与病原（病毒或细菌）的综合作用可能是造成养殖贝类大规模死亡的主要原因。壬基酚NP作为一种常见且分布广泛的环境激素,其持续性毒害作用有可能对动物的免疫系统产出负面影响,进而再有病原刺激时,更容易出现死亡现象。因此,有必要对NP对养殖贝类如扇贝,牡蛎等免疫系统的影响进行研究。因此,在本项研究中,我们选取了海洋双壳贝类栉孔扇贝Chlamys farreri及长牡蛎Crassostrea gigas,利用荧光定量技术研究了不同浓度NP暴露后免疫相关基因的转录表达变化以及抗氧化酶的酶活变化情况。主要研究结果如下:1.鉴定了栉孔扇贝MAVS基因（Gen Bank登录号:OM069740）。序列分析发现,栉孔扇贝MAVS的开放阅读框长1305 bp,可编码434个氨基酸,蛋白的分子量约为49.7 k Da。Cf MAVS蛋白具有典型的N端CARD结构域,中间的死亡结构域（DEATH）和C端的跨膜结构域。多序列比对结果表明,软体动物和脊椎动物的MAVS蛋白CARD结构域具有更高的相似性。系统发育分析表明,用于系统发育树构建的所有MAVS蛋白可分为两组:脊椎动物和无脊椎动物MAVS蛋白。Cf MAVS和长牡蛎Crassostrea gigas MAVS首先聚在一起。初步证实了我们鉴定的MAVS基因是无脊椎动物MAVS基因家族的一员。2.利用实时荧光定量PCR实验研究了NP刺激后栉孔扇贝RLR/TLR天然免疫通路、细胞凋亡系统和细胞抗氧化系统等相关基因的时序表达模式。结果显示,不同浓度NP刺激显著诱导了这些免疫相关基因的表达。此外,在不同浓度NP刺激后,栉孔扇贝抗氧化酶活性发生了明显变化。这些结果表明NP应激对扇贝免疫系统的影响是广泛且持续的;同时这些免疫基因的差异表达以及酶活的变化也显示了栉孔扇贝应对NP胁迫时其机体调控机制的复杂性。3.利用实时荧光定量PCR实验研究了NP刺激后长牡蛎细胞抗氧化酶、热休克蛋白和转录因子NF-κB家族等相关基因的时序表达模式。定量结果显示,在NP刺激后,长牡蛎这些免疫相关基因的表达受显著诱导,且不同浓度NP刺激后,机体表现出不同的表达模式。提示NP应激对长牡蛎免疫系统的广泛影响,同样也显示长牡蛎应对NP胁迫自身调控机制的复杂性。综上所述,我们鉴定了栉孔扇贝天然免疫关键的接头分子MAVS基因。荧光定量及酶活实验结果显示,NP刺激可显著诱导栉孔扇贝免疫相关基因的表达,并显著改变扇贝抗氧化酶的酶活性。同时定量实验结果显示长牡蛎的一些免疫相关基因在NP暴露后均发生了明显的诱导表达。并且在不同浓度NP刺激后,这些免疫相关基因表现出不同的表达模式。这些实验结果初步证明了NP刺激对扇贝及牡蛎免疫系统的影响,为以后结合病原刺激实验,解析贝类大规模死亡原因打下基础,同时也为明晰海洋贝类响应NP胁迫的分子机制提供参考。