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[目的]1.通过纤维支气管镜引导电圈套器电灼损伤犬气道建立犬气管狭窄模型;2.采用特制的电喷雾系统制备生物惰性聚氨酯膜的紫杉醇药物洗脱气管覆膜支架;3.通过置入紫杉醇药物洗脱气管支架寻找抑制犬气管狭窄支架置入后肉芽组织增生的治疗方法及实验证据。[方法]1.电圈套器电灼法建立犬气管狭窄模型实验动物全麻后在纤维支气管镜引导下,在距声门8cm的气管中段C形软骨环上定位均匀分布的8个点作为灼烧点。通过电圈套器灼烧破坏气管软骨环至软骨层。术后每周行纤维支气管镜及CT检查以评估其术后并发症及狭窄率(stenotic rate,SR)。根据CT检查结果按公式SR=(S-s)/S×100%计算气管狭窄率(SR:狭窄率S:术前气管面积s:检查时管腔面积)。于术后2周、4周或当狭窄程度大于90%时处死实验犬,取大体标本观察并行HE、Masson染色观察组织形态学。2.PTX气管载药支架的制备首先聚氨酯微球溶于四氢呋喃(THF)和N,N-二甲基酰胺(DMF)的溶剂混合物中(v/v 9:1),制作PTX载药溶液,随后将PTX溶于该溶液制成预定好的药物浓度,利用电喷涂制作药物洗脱支架。扫描电镜检测药膜完整性。3.PTX气管药物支架在抑制支架置入后再狭窄中的作用将8只犬随机分为非载药支架对照组(n=4)和PTX载药支架实验组(n=4)。两组气管狭窄模型建立后利用支架推送器分别置入没有载药的镍钛合金聚氨醋覆膜支架及聚氨酯PTX药物支架。支架置入后每周行纤维支气管镜及CT检查,观察每组支架情况及管腔狭窄程度。两组观察期均为3个月,实验组及对照组均于支架置入后3个月处死所有犬。动物处死后取气道标本予大体标本观察并行HE、Masson染色观察实验动物的组织学变化,评估各组标本气管炎症浸润程度。[结果]1.圈套器电灼法建立犬气管狭窄模型所有犬均能良好耐受气管圈套器电灼手术,无明显手术并发症。术后第7天所有犬CT检查示26%中位狭窄度,无明显呼吸道症状。术后第14天出现气促、喘息,CT检查显示肉芽组织增生明显,中位狭窄度72%。第21天所有犬均开始出现喘鸣音及肋间隙凹陷,狭窄度86%。CT观察见气管中段距声门8cm处气管环间形成环形狭窄,范围1cm。大体标本见管腔狭窄及气管软骨塌陷;病理学切片显示软骨破坏、肉芽组织形成、炎症细胞浸润、纤维化等病理学改变。2.PTX载药气管支架的制备利用电喷雾法可制备PTX聚氨酯载药气管支架。扫描电镜观察可见药物膜完整、支架无磨损。3.PTX气管载药支架在支架置入后再狭窄中的抑制作用所有犬均一次性成功置入支架,8只犬存活至观察终点3个月,无不良事件发生。支架置入2周时仅部分对照组出现少量组织增生,实验组见周围少许溃疡形成。1月后对照组肉芽组织增生明显,气管2度狭窄,实验组见端口组织包埋,气管1度狭窄。支架置入3个月后,对照组肉芽组织大量增生,组织生长突入支架内,气管4度以上狭窄,组织标本以1度炎症细胞浸润并3度纤维化;实验组仅端口见中等量肉芽组织增生,气管2度以上狭窄,组织标本为2度炎性浸润伴2度纤维化。差异均具有统计学意义。[结论]1.利用圈套器电灼法可建立犬气管狭窄模型,该方法具有操作简便、快速、安全,可重复性强、程度一致性良好及临床相似度高的优点。2.通过电喷涂法可制备PTX气管载药支架,具备应用价值。3.PTX气管载药支架在置入后缓慢释放PTX,在一定程度有效抑制气管损伤后肉芽组织增生,减小气管狭窄程度。