自备抗hnRNPA2/B1多克隆抗体在非小细胞肺癌中的应用探讨

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目的:采用实验室自备的抗hnRNPA2/B1多克隆抗体来探讨不同肺组织中hnRNPA2/B1表达水平是否存在差异,肺癌组织中hnRNPA2/B1表达水平与临床病理生理特征的关系,以及检测hnRNPA2/B1表达用于指导肺癌术后预后的可能性。方法:本研究联合应用免疫组化技术和流式细胞术分别定性定量检测45例NSCLC癌组织、16例肺炎性假瘤组织、5例正常肺组织中hnRNPA2/B1蛋白表达情况。并且与国外商品化的抗hnRNP A2/B1单克隆抗体进行比较,以观察自主制备的多抗在临床中的应用价值。结果:本研究观察到:①应用自制的多抗在NSCLC组中免疫组化表达阳性率(62.22%)显著高于癌旁组织(40%,P=0.035)及炎性假瘤组(31.25%,P﹦0.033)。②与临床病理特征的关系研究中发现,表达阳性与年龄、吸烟、分化程度具有相关性,与年龄、吸烟呈正相关,与分化程度呈负相关,而与性别、肿瘤体积大小、病理分型、淋巴结转移、TNM分期无统计学相关性。③通过流式细胞技术对组织内的hnRNPA2/B1蛋白进行定量检测发现:NSCLC组织内的含量(35.42±2.81)显著高于肺炎性假瘤组(17.60±3.58),及正常的肺组织(12.45±10.24),且FCM结果与免疫组化表达情况基本一致,发现NSCLC细胞内hnRNP A2/B1的含量显著高于肺良性肿瘤细胞及正常肺细胞(P<0.05)。且免疫组化评分指数高的同一组织,采用FCM检测hnRNPA2/B1的荧光指数也相应较高。④在随访后发现免疫组化阳性组和阴性组总体生存时间有差别,阳性组病人的总体生存时间较阴性组短(P=0.048)。其中阳性组的两年存活率为46.43%(13/28),阴性组的存活率为64.71%(11/17)(P﹦0.059),在两组间三年存活率有明显的差别,阳性组为10.71%(3/28),阴性组为47.06 % (8/17)(P=0.006),说明A2/B1的高表达是肺癌预后中的一个可能有价值的分子标志物,术后阳性组病人大部分死于术后的24~36个月时间段,且主要与肺癌的远处转移有关。结论:①肺炎性假瘤组织、癌旁组织、NSCLC组织中hnRNPA2/B1蛋白表达水平呈递增趋势。②NSCLC组织中hnRNP A2/B1表达情况与年龄、吸烟、分化程度具有相关性,而与性别、肿瘤体积大小、病理分型、淋巴结转移、TNM分期无相关性。③肺癌组织中hnRNP A2/B1的表达与病人术后生存时间有相关性。④无论采用免疫组化技术还是FCM技术,对NSCLC的诊断、判断预后均具有一定的临床价值。⑤抗hnRNP A2/B1多抗的制备基本上是成功的,有一定的临床应用价值,检测hnRNP A2/B1表达可能有助于肺癌的早期诊断、指导病情的预测和肺癌术后多学科综合治疗。
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