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目的:在体外细胞水平上观察酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达下调对Lewis肺癌(LLC)细胞增殖、迁移及凋亡的影响。在体内动物水平上观察ACAT-1抑制剂avasimibe对荷LLC小鼠的肿瘤生长及转移的影响,同时检测ACAT-1在LLC组织中的表达,以期为肺癌研究增添新的内容,并为临床上肺癌治疗提供新思路和新策略。方法:1、通过流式细胞术,蛋白质印迹和免疫荧光法检测avasimibe对LLC细胞的ACAT-1蛋白的表达的影响。2、采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法和细胞划痕实验研究不同浓度avasimibe对LLC细胞增殖和迁移的影响。3、通过Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测ACAT-1蛋白水平对LLC细胞凋亡影响。4、此外,我们观察了avasimibe对LLC小鼠肿瘤生长、转移的抑制作用以及对免疫功能的影响。5、收集来自荷LLC小鼠和野生小鼠的组织,通过蛋白质印迹检测ACAT-1的表达。结果:1.Avasimibe可以有效下调LLC细胞中的ACAT-1表达用avasimibe处理LLC细胞72小时,通过流式细胞术,蛋白质印迹和免疫荧光法检测发现avasimibe可有效抑制ACAT-1的表达(P<0.05)。2.ACAT-1的表达降低抑制了LLC细胞的增殖能力用avasimibe处理LLC细胞以抑制ACAT-1的表达,通过CCK-8法检测发现avasimibe可以减弱LLC细胞的增殖能力,并呈浓度和时间依赖性。对照组和avasimibe处理组(2.5,5,10和20μM)的细胞存活率分别为100±0%,63.57±4.88%,45.47±5.35%,37.66±3.72%和30.59±1.24%;对照组和不同时间组(1,2,3,4天)的生存能力分别为100±0%,72.21±4.50%,58.60±5.25%,46.11±3.9%和39.02±3.04%。3.ACAT-1的表达降低抑制了LLC细胞的迁移能力用avasimibe处理LLC细胞以抑制ACAT-1的表达,通过细胞划痕实验检测发现avasimibe可以减弱LLC细胞的迁移能力(P<0.05)。Avasimibe处理组(5,10μM)和对照组的伤口愈合率分别为18.90±2.37%,11.07±1.27%和40.63±4.98%。4.ACAT-1的表达降低促进了LLC细胞的凋亡。用avasimibe处理LLC细胞,通过流式细胞术检测发现avasimibe促进了LLC细胞凋亡(P<0.05)。5.Avasimibe抑制了荷Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长和转移。我们建立了LLC小鼠模型以验证ACAT-1抑制剂avasimibe的体内抗肿瘤作用。我们的结果显示:与对照组相比,avasimibe可以有效抑制肿瘤生长,减小肿瘤体积(P<0.01),并可增加脾脏重量和脾脏指数(P<0.01)。与CTX和avasimibe单一治疗组相比,CTX+avasimibe联合治疗可以比单一治疗更有效地抑制肿瘤生长(P<0.01)。另外avasimibe没有导致小鼠体重明显的变化。在研究终点也评估了远处器官(肝脏和肺脏)的转移性病变:在对照组中,每只小鼠的肝脏和肺中均观察到至少一个转移性病变,而在其他组中没有发现转移性病变的证据。这些结果进一步证实,avasimibe抑制了荷LLC小鼠的肿瘤生长和转移,以及增强了小鼠的免疫应答能力。此外,avasimibe也增强了CTX的抗肿瘤作用。6.ACAT-1在荷Lewis肺癌小鼠中的表达高于对照小鼠。与对照小鼠相比,LLC小鼠肺组织ACAT-1的表达更高(P<0.05)。结论:Avasimibe可通过下调ACAT-1的表达来抑制LLC的生长及转移,ACAT-1可能是肺癌的潜在治疗靶点。