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背景血红素氧化酶-1 (Heme oxygenase-1，HO-1)是血红素代谢的起始酶和限速酶，具有抗炎、抗氧化和抗细胞增殖的作用。研究表明，HO-1可抑制血管平滑肌细胞增殖。阿托伐他汀是目前最有效的他汀类制剂之一，除具有明显的降脂作用外，还可以抑制血管平滑肌细胞增殖。阿托伐他汀抑制血管平滑肌细胞增殖的机制尚不是很明确。阿托伐他汀是否通过诱导HO-1表达而抑制血管平滑肌细胞增殖尚未见报道。目的研究阿托伐他汀对血管平滑肌细胞增殖和血红素氧化酶(HO-1)表达的影响，观察阿托伐他汀＋信号通道阻滞剂对血管平滑肌细胞HO-1mRNA表达的影响，以探讨阿托伐他汀诱导的HO-1在抗血管平滑肌细胞增殖中的作用及阿托伐他汀诱导HO-1表达的信号机制。方法1、酶消化法分离大鼠胸主动脉的血管平滑肌细胞，进行形态学观察，并运用免疫细胞化学法进行细胞鉴定。2、取其4-6代细胞用于实验，IGF-I刺激血管平滑肌细胞增殖，以不同浓度(0、0.01、0.1、1、10μmol／L)的阿托伐他汀、10μmol／L阿托伐他汀＋锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)进行干预。3、在10μmol／L阿托伐他汀干预的基础上分别加入LY294002(PI3K信号通道阻滞剂)、SB203580(P38信号通道阻滞剂)、PD98059(ERK信号通道阻滞剂)。4、采用台盼兰染色活细胞计数、四唑盐(MTT)比色法观察细胞的增殖。免疫细胞化学方法观察细胞HO-1的表达。逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)半定量分析细胞HO-1mRNA的表达。结果1、IGF-Ⅰ可促进血管平滑肌细胞增殖，与空白组比较，IGF-Ⅰ组细胞计数明显增加(P＜0.01)，随着阿托伐他汀浓度的提高，血管平滑肌细胞计数逐渐减少(P＜0.01)，加入ZnPPⅨ(特异性HO-1阻滞剂)后血管平滑肌细胞增殖恢复。2、空白组和IGF-Ⅰ组血管平滑肌细胞有少量的HO-1表达，随着阿托伐他汀浓度的增加，HO-1的表达增强，呈剂量依赖性。与空白组和IGF-1组比较，0.01μmol／L组HO-1增加不明显，0.1μmol／L组HO-1开始有较明显增加、10μmol／L组HO-1表达达高峰(P＜0.01)。3、10μmol／L阿托伐他汀干预的基础上，加入PD98059，HO-1mRNA表达无明显减少(P＞0.05)；加入LY294002、SB203580后，HO-1mRNA表达明显减少(P＜0.01)，两者合用时HO-1mRNA表达更低。结论1、阿托伐他汀可抑制血管平滑肌细胞的增殖。2、阿托伐他汀可诱导HO-1的表达。3、诱导HO-1表达是阿托伐他汀抑制血管平滑肌细胞增殖的机制之一。4、阿托伐他汀主要通过p38、PI3K信号途径诱导HO-1的表达。背景血管平滑肌细胞增殖引起的血管内膜增生是介入治疗术后再狭窄的主要原因，HO-1可抑制血管平滑肌细胞增殖。雷帕霉素是一种新型的免疫抑制剂，目前广泛应用于药物支架的药物涂层，可通过抑制血管平滑肌细胞增殖而防治再狭窄，雷帕霉素抑制血管平滑肌细胞增殖的机制不是很明确。其抑制血管平滑肌细胞增生是否与HO-1有关值得研究。其与阿托伐他汀联合使用对HO-1的影响尚未见报道，有待深入研究。目的研究雷帕霉素对HO-1表达及血管平滑肌细胞增殖的影响，以探讨雷帕霉素诱导的HO-1在抗血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法培养的4-6代血管平滑肌细胞，以IGF-1刺激细胞增殖，分别加入不同浓度的雷帕霉素(0、0.01、0.1、1、10μmol／L)、雷帕霉素＋／－阿托伐他汀＋／－ZnPPⅨ(均为10μmol／L)进行干预。采用台盼兰染色活细胞计数、四唑盐(MTT)比色法观察细胞的增殖。免疫细胞化学方法观察细胞HO-1的表达。逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)半定量分析HO-1mRNA的表达。结果1、IGF-Ⅰ可促进血管平滑肌细胞增殖，随着雷帕霉素浓度的提高，血管平滑肌细胞计数逐渐减少，与IGF-Ⅰ组比较，0.01μmol／L组细胞计数无显著差异(P＞0.05)，0.1、1、10μmol／L组细胞计数减少(P＜0.01)；联合使用阿托伐他汀时血管平滑肌细胞计数更少，与10μmol／L组比较，阿托伐他汀和雷帕霉素联合治疗组细胞计数显著减少(P＜0.01)；加入ZnPPⅨ后血管平滑肌细胞增殖恢复。2、空白组和IGF-Ⅰ血管平滑肌细胞的HO-1有少量表达，随着雷帕霉素浓度的增加，HO-1的表达增强，呈剂量依赖性。与空白组和IGF-1组比较，0.01μmol／L组HO-1增加不明显(P＞0.05)；0.1μmol／L组HO-1开始有较明显增加、10μmol／L组HO-1表达达高峰(P＜0.01)，联合使用阿托伐他汀时HO-1表达更强(P＜0.01)。结论：1、雷帕霉素可抑制血管平滑肌细胞增殖。2、雷帕霉素可诱导HO-1的表达。3、诱导HO-1表达是雷帕霉素抑制血管平滑肌细胞增殖的机制之一。4、雷帕霉素和阿托伐他汀联合使用具有更好的诱导HO-1表达和抑制VSMC增殖的作用。背景经皮腔内冠状动脉成形术(Percautaneous luminalcoronary angioplasty，PTCA)是目前冠心病的主要治疗手段，术后仍有不少患者出现再狭窄，是介入心脏病学的难题之一。损伤血管平滑肌细胞增殖，内膜增生是再狭窄形成的主要原因。研究显示，HO-1可以抑制损伤血管的平滑肌细胞增殖，抑制血管内膜增生。阿托伐他汀和雷帕霉素都可以在一定程度上防止再狭窄的发生，他们是否通过诱导血管壁HO-1的表达而抑制血管内膜增生、防治再狭窄尚未见报道，有待于深入研究。目的研究大鼠颈动脉球囊扩张损伤后HO-1的表达及阿托伐他汀和雷帕霉素对球囊损伤后HO-1表达和内膜增生的影响。探讨HO-1在阿托伐他汀和雷帕霉素防治再狭窄中的作用。方法48只健康雄性SD大鼠，随机分成正常对照组、手术未干预组、阿托伐他汀组、雷帕霉素组、阿托伐他汀＋雷帕霉素组、阿托伐他汀＋ZnPPⅨ组、雷帕霉素＋ZnPPⅨ组、阿托伐他汀＋雷帕霉素＋ZnPPⅨ组。球囊损伤左侧颈总动脉，右侧颈总动脉作为对照。28天后处死动物，HE染色观察内膜及中膜增生情况，计算内膜和中膜面积及其比值。免疫组织化学法及RT-PCR观察HO-1的表达。结果与正常对照组血管比较，损伤组对侧血管内膜无明显增生(P＞0.05)，损伤侧血管内膜增生明显(P＜0.01)。与手术未干预组比较，雷帕霉素组、阿托他汀组、阿托伐他汀＋雷帕霉素组的损伤侧内膜横截面面积及内膜与中膜横截面面积比值明显减少(P＜0.01)；阿托伐他汀＋ZnPPⅨ组、雷帕霉素＋ZnPPⅨ组、阿托伐他汀＋雷帕霉素＋ZnPPⅨ组则无显著性差异(P＞0.05)。与正常对照组血管比较，手术未干预组HO-1升高(P＜0.01)；与手术未干预组比较，雷帕霉素组、阿托他汀组、阿托伐他汀＋雷帕霉素组的HO-1的表达明显升高(P＜0.01)；与雷帕霉素组、阿托他汀组比较，阿托伐他汀＋雷帕霉素组诱导HO-1表达作用更显著(P＜0.01)。结论球囊扩张损伤大鼠颈总动脉模型可作为研究血管再狭窄的较为理想的动物模型。阿托伐他汀和雷帕霉素可以防治大鼠颈动脉损伤后血管内膜增生及再狭窄的形成，诱导HO-1表达为其作用机制之一。阿托伐他汀和雷帕霉素在诱导HO-1的表达和防止再狭窄形成方面有协同作用。