不同倍性葡萄杂交胚挽救抗寒种质创新

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ahclgc
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无核葡萄是鲜食、制干、制罐的优良原料,是当前国际葡萄生产和消费的发展方向和趋势。无核葡萄多属于欧亚种葡萄,无籽性是葡萄栽培和果实品质的优良特性,但种胚早期败育和较低的抗性,严重制约了无核葡萄的育种栽培。因此,选育抗性强的三倍体无核葡萄品种成为当前葡萄育种工作的重要目标之一。本研究以2个四倍体和5个二倍体葡萄为母本,以12个抗性较强的葡萄品种为父本,设置38个组合进行杂交。通过FDA荧光染色法、TTC染色法和离体培养法测定杂交父本的花粉活力,筛选葡萄花粉活力测定的最佳方法,并分析不同杂交组合的杂交亲和性强弱;以种子败育型葡萄无核翠宝、丽红宝和有核葡萄赤霞珠为试材,研究无核葡萄内源激素的变化对胚败育的影响;利用胚挽救技术和分子标记辅助技术,培育出抗寒三倍体杂种植株,并对试验中出现的畸形苗进行分类和转化利用,以期为三倍体抗寒葡萄育种供具有参考价值的新材料。主要研究结果如下:(1)FDA染色法最适于测定葡萄花粉生活力,以河津野生为父本的杂交组合属于亲和性强组合,以无核翠宝为母本的4个杂交组合属于亲和性弱组合,其中户太8号×河津野生杂交亲和性最高;北冰红×户太8号、早黑宝×火州紫玉、早黑宝×SP115、无核翠宝×山河1号、无核翠宝×新郁和无核翠宝×火州红玉等6个杂交组合有籽率为0,为杂交不亲和组合。亲本花粉活力与杂交坐果率密切相关,花粉生活力较高或中等的葡萄品种,其作为父本的杂交坐果率较高,反之,葡萄品种花粉生活力较低的,其作为父本的杂交坐果率较低。(2)无核葡萄胚珠内高含量的IAA、ABA、GA3、GA4、i PA以及较低的(IAA+GA3)/ABA和IAA/(ZR+i PA)比值不利于无核翠宝和丽红宝胚珠和胚的发育,而且它们与无核葡萄胚败育有着显著的相关性。(3)亲本基因型对胚挽救的影响不同,以四倍体早黑宝和户太8号为母本的组合胚形成率最高,分别为20.1%和13.9%,其中户太8号×北冰红的胚成苗率最高(44.7%)。以二倍体葡萄为母本的组合中,以红宝石无核为母本的组合胚形成率最高,其中红宝石无核×北冰红的胚形成率和成苗率最高,分别为13.7%和59.8%。(4)使用抗寒分子标记S241-670对2个杂交组合的12个杂交后代进行鉴定,初步确定4个抗寒株系;使用无核分子标记SCC8-1018结合根尖染色体观察和流式细胞技术对3个杂交组合的16个杂交后代进行鉴定,初步确定4个无核株系,其中1个三倍体株系。(5)在胚形成培养基和胚发育培养基中添加500 mg/L香蕉泥可以显著提高胚的形成率和萌发成苗率。(6)根据出现的畸形苗的形态,将其分为6类:(1)上胚轴只出现一个子叶;(2)既没有子叶也没有根;(3)子叶褶皱卷曲状;(4)下胚轴形成幼根,无子叶形成;(5)有子叶,但没有根;(6)早期幼苗发育停滞。通过将畸形苗转接在转化培养基中,结果发现其中子叶卷曲类型的畸形苗转化率最高,既没子叶也没根类型的畸形苗转化率最低。
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