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[目的]:初步探讨男性开角型青光眼患者的血清及房水雄激素水平,并观察雄激素对体外培养牛眼小梁细胞(BTMG)中的组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglutaminase, tTG)在mRNA水平和蛋白水平表达的影响,探讨在原发性开角型青光眼(POAG)患者房角组织中tTG的表达情况,以及其与闭角型青光眼患者和正常人眼房角组织中表达的比较。初步探讨雄激素与治疗POAG发病学的关系。[方法]: 1.取患者静脉血2ml,术中取房水0.1ml用放射免疫法检测POAG患者血清及房水中睾酮( T)。与正常人对比。2.术中取青光眼患者房角组织,采用免疫组织化学染色方法观察POAG,PACG及正常人房角组织内tTG的表达情况,用RT-PCR方法分析组织内tTG的表达水平。3.高清晰彩色医学图文分析系统采集、处理图象和应用SPSS12.0软件进行统计分析4.取新生胎牛眼采用组织块培养法进行原代培养和传代培养,通过细胞形态学及免疫组化染色法进行鉴定后,取3~5代BTMC用于实验。5.用浓度0ng/l, 5ng/l,10ng/l,15ng/l,20ng/l的睾酮作用24h。6.采用RT-PCR与Western-Blot方法检测不同浓度雄激素作用前后牛眼小梁细胞tTG表达水平的变化。[结果]: 1.与正常对照组的均值比较,19例男性POAG患者血清中睾酮(T,testosterone)的均值增高,差异有显著性。房水中T的均值也增高,并且差异存在显著性。2.免疫组织化学结果显示正常组与闭角型青光眼组房角tTG的表达并无显著差异( 0.180±0.032,0.212±0.019,P>0.05 ),而正常组与开角型青光眼组、闭角型青光眼组与开角型青光眼组房角组织tTG的表达有极显著的差异性(0.180±0.032,0.325±0.052,P<0.001;0.212±0.019,0.325±0.052,P<0.05)。3.根据培养出的细胞生长特性,形态学特征及细胞外基质如纤维连接蛋白(fibronectin, Fn)、层粘连蛋白(laminin nidogen complexes, Ln)和Ⅳ型胶原蛋白(collagen type,Ⅳ)免疫组化染色阳性等确定培养的细胞为BTMC。4.从BTMC中提取总RNA后,应用特异性牛tTG引物,将其逆转录所得的cDNA经PCR扩增,得到单一的扩增产物,片段长度为433bp。经DNA测序,证实其序列与已知牛的tTG序列完全一致。5.加入不同浓度雄激素的培养液作用后,RT-PCR产物电泳结果显示正常对照组、雄激素作用组均在433bp处出现特异性的tTG基因条带,但雄激素作用组基因表达明显高于正常对照组;各组均出现212bp的基因条带为β-actin的扩增产物且表达无明显差别。激光灰度值扫描进行半定量分析后,雄激素作用组的tTG灰度值分别为(2.111±0.016)、(2.536±0.032)和(3.176±0.026),与正常对照组的灰度值(1.487±0.013)比较,均有显著性差异(P<0.05)。但正常对照组与睾酮浓度为10ng/l的两组间无差异。[结论]:开角型青光眼患者血液与房水中雄激素含量增加,性激素代谢异常可能与其发病有关。进一步实验发现雄激素睾酮可显著增加牛小梁细胞tTG的表达。开角型青光眼房角组织tTG的表达增加,tTG的增加可能与开角型青光眼的发病有关。提示雄性激素可能通过tTG作用而与POAG发病有一定关系。