论文部分内容阅读
哺乳动物的繁殖活动是由下丘脑-垂体-性腺轴所调控的，多种细胞因子参与其中共同作用达到对繁殖活动的调节。脑源性神经生长因子（BDNF）及神经营养因子4（NT-4）作为神经营养因子家族成员，其对生殖活动的影响近年来吸引了诸多研究者的目光。已有研究证实，BDNF与NT-4在卵泡的发育，排卵及卵巢激素合成中均有重要作用，但它们对促性腺激素分泌及其受体表达的影响有待阐明。本文通过体内实验和体外实验研究了（1）外源性BDNF与NT-4对大鼠血浆促性腺激素浓度的影响；（2）BDNF与NT-4对大鼠生殖器官促性腺激素受体表达的影响；（3）BDNF及NT-4对大鼠卵泡颗粒细胞促性腺激素受体表达及雌激素分泌的影响。体内实验结果表明，成年雌性大鼠尾静脉注射BDNF重组蛋白后，血浆FSH浓度与对照组相比呈下降趋势，两者差异极显著（p＜0.01）。在BDNF与NT-4重组蛋白注射后，大鼠子宫、卵巢、输卵管上促性腺激素受体呈现出规律性变化。其中，BDNF与NT-4能够使大鼠卵巢及子宫中LHR与FSHR表达下调，但对于输卵管组织，BDNF与NT-4的注射使促性腺激素受体表达上调。通过体外培养实验发现，在添加了BDNF与NT-4重组蛋白的大鼠卵巢颗粒细胞培养体系中，BDNF与NT-4均能够提高大鼠卵巢颗粒细胞LHR和FSHR的表达，其变化呈剂量依赖关系，推测这两种因子在卵巢局部（特别是在卵巢颗粒细胞部分）可能通过自分泌或旁分泌作用增强LHR与FSHR的表达，进而促进卵泡的发育，对卵巢功能的发挥产生影响。此外，BDNF与NT-4还能够极显著提高颗粒细胞对雌激素的分泌；同时，过高的卵巢雌激素水平对GnRH的分泌产生负反馈抑制作用，导致大鼠血清FSH浓度的降低，与本研究第一部分所得结论吻合。本研究第二部分结果显示，BDNF与NT-4能够下调卵巢组织LHR与FSHR的表达，然而体外培养实验结果表明，BDNF与NT-4能够使卵巢颗粒细胞LHR与FSHR表达增强。我们推测，这种差异可能是由于BDNF和NT-4对卵巢组织与卵泡颗粒细胞调控机制的不同造成的。在组织水平，BDNF与NT-4对卵巢功能的调节可能并非直接通过作用于卵巢组织本身实现，而是通过调节促性腺激素释放，进而调节卵巢中促性腺激素受体的表达完成的，本研究第一与第二部分能够从侧面证实这一推测，即BDNF可能通过减少FSH释放降低血浆FSH浓度下调卵巢FSHR的表达；而对于卵巢颗粒细胞，BDNF与NT-4可能直接通过局部的神经营养因子的旁分泌或者自分泌作用实现对颗粒细胞机能的调节。另推测，BDNF与NT-4在血液中的浓度可能存在稳恒状态，一旦外源性蛋白注射破坏了这种稳恒状态，就可能会对促性腺激素释放及其受体表达产生抑制效应。但其究竟通过何种神经传递途径或信号转导方式实现，还需要进一步的探索。综上所述，本研究表明，BDNF和NT-4可能通过影响促性腺激素的分泌和调节促性腺激素受体的表达这两种方式实现对生殖组织的调控；除上述神经支配作用外，BDNF与NT-4还可能以自分泌或旁分泌方式影响动物的生殖机能。