目的： 运用激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度的消旋布比卡因、左旋布比卡因和罗哌卡因对KCl诱导的大鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度的影响，进而探讨局麻药心肌抑制作用的机制。 方法： 1、将新生SD大鼠的心脏取出并剪成1mm³大小的心肌碎块，以0.08％胰蛋白酶消化、分离后，用10％胎牛血清制成细胞悬液，采用差速黏附技术将心肌细胞提纯达90％，按1×10⁵／ml密度接种，置于37℃、5％CO₂孵箱中进行培养。 2、对培养的新生大鼠心室肌细胞行α-actin免疫组化染色以鉴定是否为心肌细胞。 3、将培养的心室肌细胞随机分为10组，分别为对照组（C组）、10μM消旋布比卡因组（B1组）、50μM消旋布比卡因组（B2组）、100μM消旋布比卡因组（B3组）、10μM左旋布比卡因组（L1组）、50μM左旋布比卡因组（L2组）、100μM左旋布比卡因组（L3组）、10μM罗派卡因组（R1组）、50μM罗派卡因组（R2组）和100μM罗派卡因组（R3组）。 4、将培养的心室肌细胞用DMEM液清洗后，加入20μM Fluo-3／AM和2％的Pluronic F-127，于37℃、5％的CO₂孵箱中温育30min，再用DMEM液洗去细胞外的Fluo-3／AM。 5、运用激光扫描共聚焦显微动态观察Fluo-3负载的单个心室肌细胞内钙荧光强度的变化，比较不同浓度的消旋布比卡因、左旋布比卡因和罗哌卡因对KCl诱导的心室肌细胞内游离钙离子浓度的影响。 结果： 1、培养的新生大鼠心室肌细胞贴壁生长，呈不规则的星形，能自主节 军医进修学院硕士学位论文律性搏动。经Q一adin单克隆抗体免疫组化染色后，细胞胞浆内呈棕染，证明为心肌细胞。 2、Bl组、L1组、Rl组与C组比较对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内钙荧光强度的影响无显著性差异（P>0.05）。BZ组和B3组、LZ组和L3组、RZ组和R3组则对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内钙荧光强度均产生明显抑制（P<0 .05）。 3、相同药物不同浓度之间比较，对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内钙荧光强度的抑制程度:B3组>BZ组>Bl组、L3组>LZ组>L1组、R3组>RZ组>Rl组（P<0 .05）。 4、相同浓度不同药物之间比较，对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内钙荧光强度的抑制程度:BZ组大于LZ组和RZ组（P<0.05），LZ组和RZ组之间无显著性差异（P>.05）;B3组大于L3组和R3组（P<0.05），L3组和R3组之间无显著性差异（P>.05）。结论: 1、低浓度的消旋布比卡因、左旋布比卡因和罗呱卡因对KCI诱导的大鼠心室肌细胞内[C a2+]i无明显影响。 2、高浓度的消旋布比卡因、左旋布比卡因和罗呱卡因则明显抑制KCI诱导的大鼠心室肌细胞内[C a 2+]1。 3、三种局麻药均为浓度越高对Kcl诱导的大鼠心室肌细胞内[C a2+]i的抑制程度越大。 4、同浓度的消旋布比卡因对Kcl诱导的大鼠心室肌细胞内[C a 2+]1抑制作用大于左旋布比卡因和罗呱卡因，后两者无明显区别。 5、消旋布比卡因、左旋布比卡因和罗呱卡因呈浓度依赖性抑制兴奋收缩藕联时心室肌细胞内游离钙离子的浓度，可能是它们导致心肌抑制作用的原因之一。