基于两种色谱技术的腰痛片指纹图谱构建及谱—效关系的研究

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目的利用HPLC、GC两种色谱技术建立腰痛片含量测定和指纹图谱的方法,评价企业腰痛片质量的优劣,建立雄性小鼠肾阳虚模型,进行腰痛片治疗雄性小鼠肾阳虚模型的研究,从药效学试验结果来验证建立的指纹图谱作为评价腰痛片质量优劣的合理性,并初步探讨腰痛片HPLC指纹图谱与治疗肾阳虚小鼠之间的谱-效关系,为腰痛片质量标准的提高提供参考依据。方法首先采用HPLC、GC两种色谱技术,建立HPLC、GC含量测定的方法,对样品进行定量分析,采用HPLC法同时测定腰痛片中活性成分芍药苷、川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素与异补骨脂素的含量,采用GC法同时测定藁本内酯和桂皮醛的含量,对所测成分的含量进行数据处理,发掘市场上不同企业腰痛片样品存在的问题。再次建立HPLC、GCf旨纹图谱,利用中药指纹图谱相似度对样品进行相似度分析,并对所得相似度数据进行分析,评价不同企业样品质量的优劣。在指纹图谱的基础上进行药效学研究,通过研究不同企业腰痛片样品治疗氢化可的松所致雄性肾阳虚小鼠的药效学指标(自主活动、镇痛潜伏期、溺亡时间、体重增长值),验证所建立的指纹图谱作为评价样品质量是否合理。最后通过化学指标成分与药理学指标相结合,采用偏最小二乘法建立谱-效关系,找出试验指标与色谱峰的相关性,进一步阐明腰痛片药效物质基础。结果两种色谱技术测定了不同企业腰痛片中活性成分芍药苷、川续断皂苷VI、补骨脂素、异补骨脂素、藁本内酯和桂皮醛的含量,发现部分企业批次间含量存在的差异显著,不同企业批间差异较大。建立的HPLC指纹图谱和GC指纹图谱对企业腰痛片整体质量进行评价,发现质量差异比较明显。建立的药效学指标与指纹图谱基本一致,初步得出了指纹图谱与药效学指标的关系。结论企业腰痛片整体质量存在差异,所建立的指纹图谱和含量测定的方法作为评价腰痛片的质量比较可信,能为腰痛片质量标准的提高提供参考。
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