荷叶为睡莲属植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)的叶片，在全世界分布广泛，是药食两用植物。近年来研究表明，荷叶具有降脂减肥、抗自由基、抗氧化、抗衰老、抑菌与抗病毒等多种生理功能，其中黄酮为其主要活性物质之一，而且黄酮类化合物还具有降血糖作用。本文旨在通过对荷叶黄酮的提取、分离纯化，继而对其进行深度研究，对分离得到的荷叶黄酮进行葡萄糖激酶激活研究，为有效利用荷叶资源提供理论基础。为此本论文开展了以下工作： 1通过单因素、Plackett-Burman设计和响应面分析法，研究了超声波辅助提取荷叶黄酮的最佳工艺条件。以荷叶总黄酮提取率为指标，通过单因素实验确定了荷叶黄酮提取工艺的参数范围，通过Plackett-Burman设计和响应面分析法确定了最佳提取条件。结果表明，最佳提取条件为乙醇浓度67％，液固比34:1，超声提取40 nun，提取3次，该条件下荷叶总黄酮提取率为3.17％。 2采用大孔树脂和聚酰胺对荷叶黄酮进行纯化。通过静态吸附-解吸实验，从HPD-100、HPD-100 A、HPD-400 A和聚酰胺中筛选出聚酰胺对荷叶黄酮进行纯化，通过研究径高比、上样液浓度、水洗量、洗脱剂浓度和用量，确定出最佳纯化工艺。结果表明，聚酰胺对荷叶黄酮具有较好的吸附和解吸能力，最佳吸附条件：径高比1:6，上样液浓度10.668 mg·mL-1:最佳解吸条件：5倍柱体积的70％乙醇作为洗脱剂。 3采用聚酰胺柱层析法分离荷叶黄酮，得到A、B、C和D四个组分，经薄层色谱法检测，组分D中主要含有槲皮素，结合高效液相色谱法测定槲皮素的含量，此方法的相对标准偏差为7.9％，平均回收率为88.6％，测得每克于荷叶粉中槲皮素的含量为0.17 mg。 4采用自制固相萃取小柱结合HPLC法测定荷叶中槲皮素的含量，确定了固相萃取柱的洗脱剂用量为14 BV，该方法的相对标准偏差为9.08％，平均回收率为99.49％。 5采用自制毛细管填充固相微萃取柱结合HPLC法测定荷叶中槲皮素的含量，确定了该固相微萃取柱的上样液体积为25μL，洗脱剂用量为14 BV，该方法的相对标准偏差为4.61％，平均回收率为89.55％。 6对荷叶粗提物及组分A、B、C、D进行GK活性的筛选，得到了具有激活GK活性的组分C，该组分的半激活浓度(EC50)为0.0803 mg·mL-1。