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银杏属裸子植物银杏科,为落叶乔木,被称为“植物界的熊猫”和“活化石”。银杏叶的药用价值极高,具有抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、降血压、降血脂、促进组织再生等作用被广泛用于畜牧养殖、医疗保健、食品工业、日化工业等众多领域。本试验主要研究了银杏叶提取物的毒理学特性,为银杏叶提取物在兽医临床的应用提供相关依据。银杏叶提取物小鼠急性毒性试验试验目的:测定银杏叶提取物小鼠经口给药的LD50值及其95%置信区间。试验方法:SPF级CD1小鼠50只,雌雄各半,银杏叶提取物用0.5%的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)助悬制备成均匀稳定的混悬液,以20mL/kg的给药体积经口给药。记录给药后14天内动物的中毒情况和死亡情况。试验结果:改良寇氏法计算银杏叶提取物的LD50值为13 429 mg/kg,95%的置信区间为12 228 mg/kg~15 098mg/kg,依据化合物急性毒性分级标准银杏叶提取物属于实际无毒物质。银杏叶提取物的大鼠亚慢性毒性试验试验目的:测定银杏叶提取物大鼠经口给药的亚慢性毒性。试验方法:SPF级SD大鼠,雌雄各40只,银杏叶提取物用用0.5%的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)助悬制备成均匀稳定的混悬液,给药体积20mL/kg,给药剂量0 mg/kg,200 mg/kg,1000 mg/kg,4000 mg/kg,连续30天经口给药。记录动物的临床症状、生长状况、食物消耗量、血常规指标、血生化指标、尿液分析、病理组织学观察等评价银杏叶提取物的的亚慢性毒性强度。实验结果:各组试验大鼠一般状况良好,未出现明显的中毒症状及死亡,体重、饲料利用率、血液学及生化指标、脏器系数及组织病理学检查也未见明显异常。受试银杏叶提取物是安全的,可以长期服用。银杏叶提取物的细菌回复突变试验试验目的:应用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验方法,在添加和不添加体外代谢活化系统(S9)的条件下检测银杏叶提取物的致突变作用,评价其潜在的遗传毒性。试验方法:平皿掺入法,选择TA97a,TA98,TA100,TA102,TA1535作为试验菌株,试验剂量128μg/皿、320μg/皿、800μg/皿、2000μg/皿、5000μg/皿,同时设置溶媒对照组(丙酮)、银杏对照(纯净水)和阳性对照组,每个处理做3个平行,记录各平皿的会变菌落数。试验结果:在有或无代谢活化系统(S9)时,测试菌株TA1535的供试品组回变菌落数平均值总小于溶剂对照组平均值的3倍,其他测试菌株供试品组回变菌落数平均数等于或大于溶剂对照组平均值的2倍,试验结果呈阴性,银杏叶提取物对所有试验菌株均无致突变性。银杏叶提取物的骨髓微核试验试验目的:应用哺乳动物红细胞微核实验检测银杏叶提取物引起小鼠成红细胞染色体损伤或有丝分裂器的损伤,评价其潜在的遗传毒性。试验方法:SPF级CD1小鼠,雌雄各30只,随机分为三组,受试物银杏叶提取物分别按125 mg/Kg,250 mg/Kg和500 mg/Kg的剂量水平对三组给药组动物进行经口给药。设一组作为对照组接受空白溶剂(纯水),另设助溶剂对照组接受羧甲基纤维素钠(CMC-Na),设一组作为阳性对照组接受环磷酰胺40 mg/Kg。实验结束时对所有存活的动物在给药24小时后实施安乐死并解剖,取两侧股骨骨髓进行骨髓涂片,在经固定、染色和封片后进行阅片检查。试验结果:在本试验条件下银杏叶提取物未诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率增高,结果为阴性,表明银杏叶提取物无致突变作用。以上实验均按照我国农业部颁布的《新兽药一般毒性试验技术要求》和《新兽药特殊毒性试验技术要求》设计进行,首次对银杏叶提取物的急性毒性、亚慢性毒性、致突变性进行了系统评价。试验结果证明,银杏叶提取物的毒性低,属于实际无毒物质、无致突变性,可以做为饲料添加剂在兽医临床养殖中放心使用。