Ⅰ型脊髓灰质炎病毒病毒样颗粒的制备与鉴定

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脊髓灰质炎(Poliomyelitis)是由脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)感染所引起的以肢体麻痹为主的急性肠道传染病,主要影响五岁以下的儿童。目前,可以通过疫苗接种来预防脊髓灰质炎病毒的传播。在我国应用的脊髓灰质炎预防性疫苗主要为口服减毒活疫苗,在国外主要是应用灭活疫苗。但灭活疫苗因无法自主生产因而成本较高。口服减毒活疫苗优势在于生产成本较低。适合在我国广泛应用。然而,由于减毒疫苗相关麻痹型脊灰(vaccine-associated paralytic poliomyelitis,VAPP)及其衍生脊髓灰质炎病毒(vaccine-derived poliovirus,VDPV)风险的存在,需要研制新型的低成本有效疫苗。基因工程重组疫苗代表了新型疫苗的发展方向,因此,本文针对脊髓灰质炎开展了基于病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的基因工程疫苗的探索研究。病毒样颗粒是含有某种病毒一个或多个结构蛋白的空心颗粒,形态结构上与天然病毒相同或相似,免疫原性强。病毒样颗粒不含有病毒核酸,不能自主复制,因此无致病性,在疫苗研发中具有广泛的应用前景。  在此背景下,本文采用酿酒酵母表达系统来制备脊髓灰质炎病毒VLP。酵母表达系统具有可规模化工业生产、成本低且得到FDA认证等特点。本课题将脊髓灰质炎病毒的P1和3ABC基因进行了优化以提高表达并将其重组到酿酒酵母表达系统中。电镜观察共表达P1和3ABC基因可产生脊髓灰质炎病毒的VLP。Western-blot检测确定表达的蛋白为脊髓灰质炎病毒的蛋白。脊髓灰质炎病毒的VLP制备成功为研究预防脊髓灰质炎病毒感染的基因工程疫苗进行有益的探索。
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