目的： (1)观察脑缺血再灌注后水通道蛋白-4表达变化，及其与缺血再灌注后脑水肿之间的关系。 (2)研究脑缺血再灌注后，AQP4的表达变化与血脑屏障通透性之间的关系。 (3)研究脑缺血再灌注后，三化汤对AQP4表达和血脑屏障通透性的影响，探讨三化汤改善大鼠缺血性脑水肿的作用机制。 方法：225只健康成年SD大鼠，随机分成缺血再灌注组、假手术对照组、给药组。线栓法制作脑缺血的动物模型，缺血2h后拔出线栓实现再灌注，假于术组除不插线栓，其余操作与缺血再灌注组相同。模型制作前，缺血再灌注组、假手术对照组每只大鼠先用生理盐水(10ml/Kg/d)灌胃3天，给药组每只大鼠先用三化汤(10ml/Kg/d)灌胃3天。定模型缺血2h为第0时，缺血再灌注组、假于术对照组组于处死前继续以生理盐水(10ml/Kg/d)灌胃3天，给药组于处死前继续以生理盐水(10ml/Kg/d)灌胃3天，于再灌注后6h、12h、24h、48h、72h，评价各组动物神经功能缺损并取出大鼠脑组织用于以下实验：(1)4％多聚甲醛灌注固定后留取大脑标本HE染色进行形态学观察，透射电镜下观察缺血后血脑屏障和细胞的超微病理改变(2)取新鲜脑组织标本，用干湿重法计算脑组织含水量，测缺血脑组织中伊文思蓝外渗的量，以EB外渗的量反应BBB通透性的变化。(3)免疫组化和RT-PCR检测AQP4及其mRNA的表达变化。 结果： (1)神经功能缺损评分：NC组大鼠不同时间点评分均为0分，即无神经功能缺损。缺血再灌注组、给药组各时间点均出现不同程度神经功能缺损。 (2)形态学观察：HE染色示对照组神经细胞数量多，细胞分布层次清楚，细胞结构清晰。模型组、给药组HE染色可见脑组织出现缺血性改变，细胞及血管周围间隙明显扩大，部分细胞坏死，胞核浓染或消失，胶质细胞增生。透射电镜下可见血管及其周围神经元、胶质细胞的超微结构有明显改变，神经细胞核异染色质边集、胞膜破裂，毛细血管周围间隙扩大，在CIR48～72h改变最明显。 (2)CIR12后，模型组脑含水量开始升高，各时间点与假手术组比较差异有统计学意义(P均＜0.05)；三化汤组CIR12h后各时间点脑含水量均明显低于模型组(P均＜0.05)。 (3)假手术组EB含量无明显改变。CIR组EB含量随再灌注时间的延长而增加；且EB含量的增加出现两个高峰，分别在CIR12h和48h，后者增加更明显。EB含量的增加与AQP4表达呈正相关，r=0.90，P＜0.05。三化汤组CIR6h后各时间点脑含水量均明显低于模型组(P均＜0.05)。 (4)AQP4蛋白表达：免疫组化结果显示AQP4阳性细胞主要表达于缺血灶及周围的皮质，在血管内皮细胞最为明显，另外在胶质细胞和室管膜细胞也有AQP4阳性细胞表达。CIR6h后，梗塞区部分组织深染，细胞肿大，梗塞区周围见阳性细胞开始增多，胞核及胞浆未见着色。MCA012h后梗塞区阳性细胞的体积增大，染色进一步增强。MCA024h后梗塞区染色呈强阳性，观察到少量完整的阳性细胞体，而梗塞区周围可见更多的阳性细胞。MCA048h-72h后梗塞区呈强阳性，梗塞区周围的阳性细胞数明显增多，阳性细胞数量与梗塞的时间呈正相关，三化汤组AQP4表达也呈上升趋势，各时间点与假于术组比较差异显著(P均＜0.05)。 (5)AOP4mRNA表达：模型组在CIR6h后AQP4mRNA表达开始升高，并逐渐升高到较高水平，各时间点与假手术组比较差异有统计学意义(P均＜0.05)，三化汤组AOP4mRNA表达也随时间的推移逐步增高，但各时间点AQP4mRNA表达都较模型组低(P均＜0.05)。 结论： (1)脑缺血再灌注后，伴随脑水肿加重，AQP4表达上调。提示脑缺血再灌注后AQP4的表达变化与脑水肿的形成密切相关，AQP4在脑缺血再灌注后脑水肿的形成中发挥着重要作用。 (2)缺血再灌注后BBB通透性的增加与脑水肿的形成密切相关，CIR后BBB通透性增加，可能与AQP4表达上调有关，两者的变化影响CIR后脑水肿的发生、发展。 (3)三化汤能减轻CIR后早期脑含水量及血脑屏障通透性，下调AQP4的表达，从而减少水向细胞内的转运可能是其改善缺血性脑水肿的机制之一。