儿童麻疹疫苗接种后远期抗体水平及Th1/Th2细胞因子分泌的研究

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目的:检测儿童接种麻疹疫苗后远期血清抗体水平,评价其体液免疫持久性;检测儿童麻疹疫苗接种后疫苗刺激T细胞亚群分泌细胞因子,探讨疫苗接种后远期细胞免疫;为麻疹疫苗免疫策略提供理论依据。方法:(1)选择麻疹疫苗接种后3~10年的儿童健康志愿者32名,每名志愿者抽取5ml外周血;其中2ml待自然凝后离心分离血清,用ELISA法检测麻疹抗体。(2)取3ml外周血分离淋巴细胞,用10%FBS-RPMI-1640液调整细胞数为1×106个/ml,设实验组(麻疹疫苗刺激组)与对照组,置5%CO2培养箱,37℃,培养50小时,取上清液检测细胞因子。(3)用流式CBA法检测全部细胞培养上清液中TNF-α,IL-10细胞因子。(4)用ELISA法检测部分细胞培养上清液中IFN-γ,TNF-α,IL-4,IL-10细胞因子。结果:(1)用ELISA法检测血清中抗体水平:结果显示32例抗体浓度均值为115.03IU/L,标准差为95.20IU/L。接种疫苗儿童抗体水平差异较大,高应答组抗体水平明显高于应答组和低应答组,p<0.05;(2)用流式CBA方法检测淋巴细胞培养上清液中TNF-α的水平,实验组中位数2021.81pg/mL,对照组中位数1481.72pg/mL,实验组的TNF-α分泌水平明显高于对照组,经Wilcoxon配对符号秩和检验,p<0.05。根据麻疹抗体水平给予分组比较,应答组及高应答组中实验组与对照组比较有明显差异,经Wilcoxon配对符号秩和检验p<0.05,低应答组中,实验组与对照组无明显差异,经Wilcoxon配对符号秩和检验,p<0.05;(3)用流式CBA方法检测淋巴细胞培养上清液中IL-10水平,实验组中位数2566.93pg/mL,对照组中位数1861.89pg/mL,实验组明显高于对照组,经Wilcoxon配对符号秩和检验,p<0.05。根据麻疹抗体水平给予分组比较,在低应答组及应答组中实验组均明显高于对照组,经Wilcoxon配对符号秩和检验,p﹤0.05,而高应答组中,实验组与对照组比较,经Wilcoxon配对符号秩和检验,p>0.05,两者无明显差异;(4)用ELISA法检测淋巴细胞培养上清液中Th1细胞因子IFN-γ、TNF-α水平,实验组、对照组IFN-γ浓度均值分别为152.07pg/mL、187.31pg/mL,经配对样本t检验,p>0.05,差异无统计学意义;TNF-α浓度均值分别为160.92pg/mL、129.57pg/mL,经配对样本t检验,差异有统计学意义,p﹤0.05;(5)用ELISA法检测淋巴细胞培养上清液中Th2细胞因子IL-4、IL-10水平,实验组、对照组IL-4浓度均值分别为182.55pg/mL、190.87pg/mL,经配对t检验,P>0.05,差异无统计学意义;IL-10浓度均数分别为554.46pg/mL、398.94pg/mL,经配对t检验,差异有统计学意义,p﹤0.05。结论:(1)32例儿童麻疹疫苗接种后3~10年抗体阳性率高,阳性率81.2%,抗体水平均值为115.03IU/L;但抗体水平与年龄、性别、接种次数及接种后时长无明显关系。(2)32例儿童麻疹疫苗接种后麻疹疫苗特异性再刺激后细胞因子:TNF-α、IL-10水平明显升高,表现Th1/Th2细胞因子疫苗刺激后分泌增高,提示体内存在免疫记忆T细胞,在接触抗原刺激后通过分泌细胞因子可介导免疫应答。
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