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目的:本研究以标准的大鼠肝纤维化为模型,随后采用了骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）移植和DNMTs抑制剂（DNA methyltransferase inhibitor,DNMTi）单独以及两者联合治疗肝纤维化,比较不同实验组的PTEN基因（涉及PI3K/AKT通路）和Smad7基因（涉及TGF-β/Smad通路）的变化。验证BMSCs是否通过调控PI3K/AKT和TGF-β/Smad通路治疗肝纤维化,为BMSCs治疗肝纤维化机制提供新的实验依据。方法:选用年龄2-3周龄、SD雄性、近交系大鼠作为BMSCs供者,BMSCs采用全贴壁法培养、纯化、传代至第3代进行移植和通过流式细胞术和免疫荧光法进行鉴定。选用42只年龄6-8周龄、SD雄性、近交系大鼠作为实验大鼠,随机分为五组:对照组（n=6）,模型组（n=6）,BMSCs移植治疗组（n=6）,DNMTs抑制组（n=18）,联合治疗组（n=6）。对照组:仅腹腔注射生理盐水0.3ml/100g,每周注射两次,注射6周;肝纤维化模型大鼠腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液（0.3ml/100g）,每周注射两次,注射6周。对照组和模型组:经门静脉注射0.5ml的PBS;BMSCs组:经门静脉移植CM-Dil标记BMSCs（1.0×106cells/ml）悬液0.5ml;DNMTs抑制剂组:分为1、3、5mg/kg3个剂量组的DNMTs抑制剂组,每周腹腔注射2次,注射两周,根据治疗效果选取联合组的浓度;联合组:经门静脉移植CM-Dil标记BMSCs（1.0×106cells/ml）悬液0.5ml+5mg/kgDNMTs每周腹腔注射两次,注射两周。移植3周后取血清学标本测谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）,取肝脏组织标本做BMSCs定植、HE、Masson、天狼星红染色,取肝脏组织标本利用WB、PCR、MSP检测PTEN和Smad7。结果:（1）对照组与模型组相比,模型组血清学指标ALT、AST、TBil显著升高,有统计学差异,P<0.01。（2）模型组与BMSCs组、DNMTs抑制剂组、联合组相比,BMSCs组、DNMTs抑制剂组、联合组血清学指标ALT、AST、T-Bil降低,有统计学差异,P<0.01,联合组最显著。（4）对照组与模型组相比,模型组PCR及WB结果显示α-SMA、Colla1、DNMT1、TGF-β1显著增多。（5）模型组与BMSCs组、DNMTs抑制剂组和联合组相比,BMSCs组、DNMTs抑制剂组和联合组的PCR及WB结果显示α-SMA、Colla1、DNMT1、TGF-β1显著减少,联合组最显著。（6）对照组与模型组相比,模型组肝纤维化后,PTEN、Smad7处于高甲基化。（7）模型组与BMSCs组、DNMTs抑制剂组和联合组相比,BMSCs组、DNMTs抑制剂组和联合组经过治疗,PTEN、Smad7去甲基化,联合组最显著。结论:（1）BMSCs移植和DNMTs抑制剂都能改善肝纤维化大鼠血清学水平,以联合治疗效果更好。（2）BMSCs移植和DNMTs抑制剂都能使肝纤维化标志物α-SMA、Colla1、DNMT1、TGF-β1表达水平显著下降,联合治疗效果更好。（3）BMSCs在治疗肝纤维化过程中,PTEN通过P13K/AKT通路和Smad7通过TGF-β/Smad通路实现肝纤维化逆转。