生长分化因子8（growth and differentiation factor-8，GDF-8）是肌肉生长的负调控因子，又称肌肉生长抑制素（myostatin，MSTN）。该基因敲除的动物具有生长速度快、肌肉含量高、脂肪含量少的特点。因此，这一基因在动物育种上具有潜在的应用前景，可以通过抑制gdf-8的活性，提高养殖品种的肌肉含量，促进养殖品种的生长。　　 由于鱼类在系统发生过程中，有基因重复现象发生，从而导致gdf-8产生两种基因型。本研究在本实验室已获得大黄鱼（Larimichthys crocea）gdf-8Ⅰ的基础上（AY842933），采用同源克隆的方法，从肌肉组织中获得了大黄鱼gdf-8Ⅱ基因DNA序列，含起始密码子及终止密码子，包括3个外显子及2个内含子，全长2357bp（EU571244）；同时以大黄鱼脑组织cDNA为模板，通过RT-PCR及RACE技术（Rapid Amplification cDNA Ends，RACE）获得了大黄鱼gdf-8Ⅱ 1080bp完整开放阅读框（Opening Reading Frame，ORF）及682bp 3’-UTR（3’-untranslated region）。这是目前国内关于鱼类gdf-8Ⅱ的首次报道。　　 序列分析发现大黄鱼gdf-8Ⅰ与gdf-8Ⅱ基因序列存在较大差异，不仅序列的长度不同，序列间相似度也不高（59.31 ％）；但在外显子Ⅲ部分，不仅序列的长度一致，且序列间相似度也很高（86.09 ％）。同时，在大黄鱼gdf-8Ⅱ的3’-UTR并没有发现存在于大黄鱼gdf-8Ⅰ的（CA）n微卫星序列。　　 大黄鱼GDF-8Ⅱ呈现出典型的TGF-β超家族成员的特点，完整的ORF预测的GDF-8Ⅱ蛋白序列由359个氨基酸组成，包含三个结构域，分别为1~18位氨基酸残基间的一个潜在的信号肽序列，33~239位氨基酸残基间的TGF-β propeptide domain和264~359位氨基酸残基间的TGF-β domain，其中在TGF-β propeptide domain的C末端含有一个保守的蛋白酶加工位点（RXXR），在TGF-β domain含有9个保守的半胱氨酸残基。　　 用常规RT-PCR检测了gdf-8Ⅰ与gdf-8Ⅱ在大黄鱼成体和个体发育早期的表达情况。其中gdf-8Ⅰ主要在肌肉中表达，而gdf-8Ⅱ则主要在脑和脂肪组织中表达，肌肉中并未检测到表达。这提示大黄鱼两型gdf-8由于基因的复制及不同的进化历程，可能使它们的功能产生分歧，主要由gdf-8Ⅰ执行抑制肌肉生长的作用，而gdf-8Ⅱ可能与脑和脂肪等的发育调控有关。另外，gdf-8Ⅰ在个体发育早期的多个阶段有表达，而gdf-8Ⅱ在这些阶段均未检测到。　　 同时，用FQ-PCR（Fluorescence Quantitative Real Time PCR）检测了gdf-8Ⅰ与gdf-8Ⅱ在大黄鱼成体和个体发育早期的表达情况。结果表明gdf-8Ⅰ与gdf-8Ⅱ在所有组织及个体发育的各个阶段均有表达，但存在较大的时空表达差异。其中gdf-8Ⅰ主要在肌肉中表达，而gdf-8Ⅱ则主要在脑和脂肪组织中表达。这一结果与常规RT-PCR检测结果一致。Gdf-8Ⅰ在个体发育早期阶段的表达量高于gdf-8Ⅱ，且gdf-8Ⅱ在发育早期各个阶段基本上处于低水平的表达状态。这提示gdf-8Ⅰ可能在大黄鱼早期形态建成，如肌节形成等方面发挥主控作用，而gdf-8Ⅱ可能司职其它功能。