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高速逆流色谱技术（high speed countercurrent chromatography，HSCCC）于1982年由美国国立卫生院Ito博士研制开发的一种新型的、连续高效的液-液分配色谱技术，与其它色谱技术不同的是它不需任何固态载体，因此能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。同时它也具有适用范围广、快速、进样量大、费用低、回收率高等优点。因此，HSCCC已在生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域获得了广泛的应用，尤其是在天然产物活性成分的分离纯化领域倍受重视。拥有两千多年历史的中药，是中华民族的国粹，一直是中华民族对抗疾病的传统用药。但自从中国加入WTO，中药因其成分复杂，缺少质量控制和量化的标准，其安全性一直受到外国的质疑，因此中药一直没有冲出国门，难以实现中药的现代化。要解决此难题，我们必须把有效成分从中药中提取出来并加以分离和精制，得到有效单体。所以，中药化学成分的提取、分离和鉴定已日益成为中药现代化的重要研究方向。电喷雾质谱（ESI-MSn）是一种软电离技术，可以用来产生离子，甚至对热不稳定、难挥发和极性化合物也适用。因为它可以直接得到母离子从中得知样品的分子量，所以无论在正离子还是负离子模式中，它都被广泛用于天然产物的分析。本文采用了HPLC优化实验条件，利用不同的溶剂体系对常用的三种中药（橘红、田基黄、射干）的乙酸乙酯粗提物或正丁醇粗提物及中大时珍堂送来的样品进行分离提纯，得到了多种活性成分，检测纯度都大于90％，并经过ESI-MSn鉴定，也再一次证明了高速逆流色谱在分离提纯中草药种的有效活性成分方面相比其他色谱技术分离手段具有快捷、方便、简单、产物纯度高等优点。利用半制备型HSCCC，以正己烷-正丁醇-甲醇-0.5％乙酸（1：3：1：4，v／v）为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，主机转速800rpm．min-1，检测波长254nm，流速为1.5 mL·min-1，在550min内经一步洗脱从50mg化橘红正丁醇萃取物中分离得到三种成分：柚皮苷、野漆皮树苷、另一个成分待定。它们的质量分别是28.8 mg、1.4 mg、5.7mg；纯度97.1％、95.5％和97.5％。利用半制备型HSCCC，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.5％乙酸／水（0.25：5：0.25：5，v／v）为两相溶剂系统，主机转速800rpm．min-1，上相为固定相，下相为流动相，0～185min流速为2.0mL．min-1，185～400min流速为3.0mL．min-1，检测波长254nm，在400min内经一步洗脱从50mg田基黄乙酸乙酯萃取物中分离得到纯度为99.1％的异槲皮苷（isoquercitrin）4.2mg、97.5％的槲皮苷（quercitrin）5.2mg、90.3％的二氢槲皮素-7-0-鼠李糖苷（Taxfolin-7-0-rhamnose）2.5mg和另外两种未知物：0.8mg纯度为93.5％的未知物1以及0.2mg纯度为95.3％的未知物2。利用半制备型HSCCC，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-0.5％乙酸／水（4：5：4：5）为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，主机转速800rpm．min-1，检测波长254nm，流速为2.0mL．min-1，在250min内经一步洗脱从50mg射干非极性的乙酸乙酯萃取物中分离得到两种成分：野鸢尾苷元、irilin D。它们的质量分别是1.3mg和1.1mg；纯度94.6％和93.2％。利用半制备型HSCCC，以正己烷-乙酸乙酯-0.5％乙酸／水（0.5：5：5）为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，主机转速800rpm．min-1，检测波长254nm，流速为2.0mL．min-1，在190min内经一步洗脱从50mg射干极性的乙酸乙酯萃取物中分离得到一种成分：3’-羟基鸢尾苷和两种未知成分，它们的质量分别是0.8mg和0.3mg、2.6mg；纯度86.6％和90.2％、93.2％。利用利用半制备型HSCCC，以正己烷-正丁醇-甲醇-水（1：5：1：5）为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，主机转速800rpm．min-1，检测波长254nm，流速为2.0mL．min-1，在250min内经一步洗脱，从50mg正丁醇萃取物中分离得到两种未知成分：它们的质量为分别是0.5 mg和0.8mg，纯度97.8％和93.1％。利用分析型HSCCC，以四氯甲烷-三氯甲烷-甲醇-0.5％乙酸／水（2.5：1.5：4：2）为两相溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，主机转速1400rpm．min-1，检测波长254nm，流速为1.0mL．min-1，在140min内经一步洗脱从5mg中大时珍堂提供的样品中分离得到三种成分。它们的质量分别是1.8 mg、0.6mg和0.2mg；纯度88.2％、83.6％和99％。