目的:构建重组质粒并原核表达人Cystatin C,制备其鼠源性单克隆抗体和兔源性多克隆抗体并鉴定其生物学活性,分析Cystatin C在食管癌和胃癌组织的表达分布情况。方法:从人的胃癌细胞AGS上克隆扩增Cystatin C基因,构建pET44-Cystatin C重组质粒,转化于大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)获得重组人Cystatin C蛋白。以复性后的纯化Cystatin C包涵体蛋白免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,从而制备鼠抗人Cystatin C单克隆抗体和兔抗人Cystatin C多克隆抗体。经Western Blot和ELISA方法鉴定单克隆抗体及多克隆抗体的特异性。应用免疫组化技术和RT-PCR等方法检测人Cystatin C在胃癌食管癌组织表达情况。结果:成功构建了人Cystatin C重组质粒并获得其纯化原核表达蛋白。免疫印迹实验和ELISA实验提示所制备单克隆抗体和多克隆抗体对天然人Cystatin C有较高的特异性。Cystatin C蛋白在食管癌组织和胃癌组织表达升高相对于癌旁正常组织。其mRNA亦在肿瘤组织中显示高表达结论:成功构建Cystatin C原核表达载体,所纯化蛋白有良好的抗原性。成功制备高效价的Cystatin C单克隆抗体和多克隆抗体。Cystatin C在食管癌胃癌组织中表达升高。