【摘 要】
：
目的:研究不同饮食条件下,不同剂量氟虫腈（Fipronil,FPN）对成年雄性C57BL/6 J小鼠糖脂代谢稳态的影响和分子机制,从而为研究FPN的致慢病作用提供新的理论依据。方法:1.将56只7-8周龄雄性C57BL/6 J小鼠随机分为八组:（纯玉米油）对照组,0.25、1和4 mg/（kg·bw）FPN组。再分别喂以高脂饲料（HFD）和常规饲料（ND）,采用每日经口灌胃染毒,记录体重、摄食量;
论文部分内容阅读
目的:研究不同饮食条件下,不同剂量氟虫腈（Fipronil,FPN）对成年雄性C57BL/6 J小鼠糖脂代谢稳态的影响和分子机制,从而为研究FPN的致慢病作用提供新的理论依据。方法:1.将56只7-8周龄雄性C57BL/6 J小鼠随机分为八组:（纯玉米油）对照组,0.25、1和4 mg/（kg·bw）FPN组。再分别喂以高脂饲料（HFD）和常规饲料（ND）,采用每日经口灌胃染毒,记录体重、摄食量;每周监测血糖、体温。于染毒5周后处死,称取体重、脏器重量,计算脏器系数;ELISA法检测血清胰岛素水平,葡萄糖耐量试验（GTT）、胰岛素耐量试验（ITT）、丙酮酸耐量试验（PTT）检测小鼠糖代谢,计算HOMA-IR指数;用酸水解法测定肝糖原含量;用Western blot分析体内胰岛素信号通路磷酸化水平。2.苏木精—伊红（H＆E）染色法观察小鼠肝脏、附睾脂肪（EWAT）、皮下脂肪（SWAT）和褐色脂肪（BAT）组织病理学变化,油红染色法观察小鼠肝脏中脂滴含量;生化分析法检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）水平;测定EWAT、SWAT的DNA含量,qRT-PCR检测肝脏和脂肪组织脂质代谢相关基因的mRNA水平及Western Blot检测相关蛋白水平变化情况。结果:1.FPN对葡萄糖代谢的作用1)ND小鼠4 mg/kg FPN组葡萄糖耐受能力显著降低;胰岛素信号通路关键蛋白磷酸化水平降低,胰岛素信号减弱。1 mg/kg FPN组肝脏糖异生作用显著增加。2)HFD小鼠在0.25和4 mg/kg FPN组饱腹血糖显著升高,1 mg/kg FPN组小鼠空腹血糖显著升高;FPN暴露使胰岛素耐受能力均受损,1和4 mg/kg FPN组小鼠葡萄糖耐受能力显著降低,糖异生表达显著增加;FPN暴露使胰岛素信号通路减弱。2.FPN对肝脏脂质代谢的作用1)ND小鼠血清TG水平随FPN染毒剂量增大而升高,肝脏TG和TC在0.25 mg/kg组明显升高,在4 mg/kg组明显降低,肝脏FFA在4 mg/kg组明显降低。脂质氧化关键蛋白PPARα在1和4 mg/kg组表达均显著增加。脂质合成相关蛋白ACC在0.25 mg/kg组表达显著增加,4 mg/kg组表达显著下调。2)HFD小鼠HE染色表明FPN暴露后肝脏组织有显著病理变化和脂质沉积。血清TG水平在4 mg/kg组显著下降,血清TC水平在1和4 mg/kg组均显著下降,肝脏TG和TC水平都随FPN染毒剂量增大而升高,肝脏FFA在4 mg/kg组水平显著升高。PPARα蛋白表达随FPN染毒剂量增大而降低,ACC蛋白在1 mg/kg组表达下降。3.FPN对脂肪组织脂质代谢的作用1)ND小鼠BAT、SWAT和EWAT细胞形态在4 mg/kg组可见脂肪细胞空腔增大,脂肪细胞体积较对照组稍大。4 mg/kg FPN组体温相较对照组明显下降,EWAT的DNA content在1 mg/kg组显著下降。2)HFD小鼠BAT、SWAT和EWAT细胞形态随FPN暴露浓度增大,脂肪细胞空腔增大越显著,脂肪细胞体积越大。BAT脏器系数在4 mg/kg FPN组下降,1和4 mg/kg FPN组体温相较对照组明显下降;EWAT的DNA content指数在0.25和1 mg/kg组显著升高;SWAT的DNA content指数在1和4 mg/kg FPN组显著下降。结论:1.FPN暴露可以增加小鼠2型糖尿病风险,这可能是因为FPN降低了胰岛素敏感性,同时诱发糖异生增加,进而引起高血糖症,且在高脂饮食条件下,效应更显著。2.FPN暴露通过影响ACC、PPARα等脂质代谢关键基因的表达,来诱发血清高脂血症和肝脏甘油三酯蓄积,诱发NAFLD,且在不同饮食下,FPN的作用机制不同。3.FPN对肥胖症的效应在常规饮食下并不显著,在高脂饮食条件下虽然体重增重效益不明显,但体脂肪比例增加,有诱导肥胖的潜能。
其他文献
铀是核电产业以及核技术应用领域的重要原料,与此同时,铀还是一种具有放射性、动态生物毒性和化学毒性的金属。大量的含铀废水产生于铀的开采冶炼、核能的利用和相关科学研究,为了生态环境不被污染以及人类健康不被威胁,对含铀水环境进行无害化治理以及对铀分离回收再利用具有重要意义。吸附是富集分离废水和海水中U（VI）的有效方法,其研究重点是制备出对铀吸附容量高、可循环利用以及无二次污染的吸附材料。海藻酸钠水凝胶
目的了解2010-2020年湖南省以及2020年湖南省各市州的卫生资源配置情况,并对其配置效率进行分析,发现问题并提出优化配置的策略,对即将启动的“十四五规划”以及政府制定更完善的卫生政策提供可参考依据。方法采用描述性分析对湖南省卫生资源配置情况进行研究;采用数据包络分析方法（Data Envelopment Analysis,DEA）中的VRS模型（Variable Returns to Sca
目的:通过干预JAK-STAT通路信号传导及敲低其上游信号分子白血病抑制因子（Leukemia inhibitory factor,LIF）,探讨JAK-STAT通路在硫酸铍致16HBE细胞上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）中的作用及其调控机制,结合前期研究,进一步阐明硫酸铍的毒作用机制。方法:1.用0、100、150、200、250、30
目的:探讨硫酸铍（beryllium sulfate,BeSO4）诱导人支气管上皮细胞（16HBE）恶性转化过程中长链非编码RNA SNHG11的作用及其机制。方法:1、用CCK-8法测定0、20、50、125和312.5μM BeSO4染毒16HBE细胞48 h后的细胞活力,计算半数抑制浓度（IC50）。2、用50μM BeSO4处理16HBE细胞45代（约23周）,每代染毒24 h,3-4天传
目的收集全球疾病负担数据库中1990～2019年中国肝癌发病及死亡数据资料,分析1990～2019年中国肝癌发病和死亡率随时间的变化趋势;建立年龄-时期-队列模型,探讨年龄、时期和队列效应对肝癌发病率变化的影响;抽样调查湖南省某高校大学生肝癌知信行现状及影响因素,为科学实施肝癌防治的健康教育、提升大学生人群健康素养提供参考依据。方法（1）收集整理全球疾病负担数据库中1990～2019年中国肝癌发病
二氧化锰纳米片（MnO2NS）是一种过渡金属氧化物的二维纳米片层材料,其合成简单,荧光猝灭能力强,可通过氧化还原反应被降解,在生物传感、药物运输、生物成像、肿瘤治疗等生物医学相关领域有着广泛的应用。本文采用MnO2NS作为检测平台,基于MnO2NS不同的理化性质对大肠埃希氏菌以及生物小分子尿酸实现了检测。本文第一章阐述了MnO2NS的合成方法、理化性质并详细介绍了MnO2NS在物质检测、药物运输、
目的:研究γ射线辐照后辐射旁效应对HepG2细胞的影响,探讨ATM-AKT-Nrf2通路参与调控辐射诱导辐射旁效应的相关机制。方法:实验采用人肝癌HepG2细胞,利用转移辐射条件刺激液模式建立辐射诱导的细胞旁效应模型,用1、3、5、7、9μmol/L KU60019抑制ATM,0.5、1、1.5、2μmol/L MK2206抑制AKT。实验分组为（1）:空白组（NC组）、辐射旁效应组（ICM组）、
目的了解2010-2020年湖南省医疗卫生资源配置现状,并对其配置公平性进行综合分析,发现问题并提出相关合理化建议,为卫生资源规划配置提供决策支持。方法采用描述性分析法分析湖南省医疗卫生资源现状;采用基尼系数和洛伦兹曲线对整体卫生资源配置的公平性进行分析;计算泰尔指数,分析区域间与区域内卫生资源差异;利用卫生资源密度指数法分析各市州卫生资源的集中水平;最终运用罗宾汉指数计算高水平卫生资源地区向低水
目的:随着时代的进步与发展,劳动者的生活方式、生产环境和疾病谱也在不断发生变化,初步构建一个科学、可靠且实用的企业健康融入度评价指标体系,对推动健康企业建设具有监督和指引作用,也能为落实“将健康融入所有政策”提供基础资料,助推健康中国建设。方法:通过文献研究法和专家深入访谈法建立指标体系的逻辑框架与指标备选库,选择“结构-过程-结果”理论模型作为逻辑框架,通过两轮德尔菲法确定最终的评价指标,最后使
目的:探讨PM2.5对人支气管上皮（HBE）细胞及K-ras基因沉默后的HBE细胞中相关癌基因及蛋白质差异表达情况,为深入研究PM2.5的毒理学机制提供科学依据。方法:根据K-ras基因的m RNA序列,设计合成干扰序列,通过构建载体,慢病毒转染,最终沉默HBE细胞中的K-ras基因,构建K-ras沉默细胞株。采用PM2.5混悬液（10μg/m L和50μg/m L）染毒HBE细胞和K-ras基因