论文部分内容阅读
目的:观察清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤缺血侧皮层及海马区VEGF、PDGF表达的影响,探讨清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤神经元保护的作用机制。方法:将成年健康雄性SD大鼠192只,按随机数字表分为两大组,每组96只,继续随机分为4个亚组:空白组(A组6只)、假手术组(B组30只)、模型对照组(C组30只)、清脑益元组(D组30只)。假手术组、模型对照组及清脑益元组均按缺血损伤后1d、3d、7d、14d、28d五个处死时间点分为5个亚组(n=6),并分别作如下处理:空白正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;假手术组单纯手术而未插线动物,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;模型对照组灌胃等体积蒸馏水7d后,麻醉,行MACO术,术后制成大鼠急性脑缺血损伤大鼠模型,待大鼠麻醉清醒后,继续予生理盐水灌胃至各处死时间点。清脑益元组灌胃等体积清脑益元7d后操作同模型对照组,待大鼠麻醉清醒后,继续予中药灌胃至大鼠各处死时间点。参考Longa的5分制法对大鼠进行神经功能缺损评分,并按各时间点进行标本采集。取材后,一组应用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real Time PCR)检测大鼠缺血侧皮层及海马区VEGF的表达,另一组应用蛋白质印迹法(Western Blot)检测大鼠缺血侧皮层及海马区PDGF的表达。结果:1.RT-PCR检测结果:与假手术组比较,模型组脑组织VEGF的mRNA表达在各时间点均有所升高,但统计学比较无显著差异。与模型组比较,清脑益元组VEGF mRNA表达在各时间点均显著增高。清脑益元组早期(第1天)可见VEGF表达增高,在早期(第3天)就明显升高,并逐渐升高第14天达到高峰;在模型对照组VEGF表达成缓慢增长的趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。2.蛋白质印迹法结果:与模型组比较,清脑益元组PDGF的表达在各时间点均显著增高。清脑益元组早期(第1天)可见PDGF的明显增高,在早期(第3天)呈稍放缓但仍很明显的增高趋势,并逐渐升高第14天达到高峰;在模型组PDGF表达成缓慢增长的趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤神经元的保护作用可能与VEGF、PDGF表达的增加有关。