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目的:(1)T2DM小鼠骨中LncRNA MEG3/p62/Runx2途径被抑制后对成骨细胞分化及骨形成代谢的影响。(2)探究不同运动方式对T2DM小鼠骨形成代谢的影响,以及LncRNA MEG3/p62/Runx2途径在此过程中有何变化。方法:将55只4周龄C57BL/6雄性小鼠(初始体重16.2±0.8g),适应性喂养一周后,随机分为正常对照组(NC,12只)和T2DM造模组43只。8周高脂膳食喂养后,空腹24h,对T2DM造模组注射STZ(按110mg/kg),NC组注射柠檬酸/柠檬酸钠溶液(浓度参照STZ同等浓度110mg/kg)。3天后空腹12h,检测尾静脉血糖浓度,血糖浓度≥16.7 mmol/L为T2DM小鼠,造模成功40只,随机分为T2DM对照组(TC,n=13)、T2DM+下坡跑运动组(TP,n=14)、T2DM+高强度间歇性运动组(TG,n=13)。T2DM小鼠继续高脂膳食,NC组小鼠喂以普通饲料,按照方案进行饲养和训练。8周后,称量各组小鼠体重、骨湿重;游标卡尺测量各组小鼠胫骨骨形态指标;Micro-CT扫描各组小鼠股骨,检测骨形态计量学指标;HE染色观察各组小鼠骨组织形态结构;AKP染色观察各组小鼠OB活性;取各组小鼠血清,检测血清中AKP活力、钙离子和磷离子浓度;RT-PCR检测小鼠骨中LncRNA MEG3、miR-16、PI3K、Akt、mTOR、p62、NF-κB和Runx2的mRNA表达;Western Blot检测各组小鼠骨中 Akt、mTOR、p62和Runx2蛋白表达。结果:(1)与NC组相比,TC组小鼠体重显著增加(P<0.01);胫骨湿重、远端冠状轴宽度、中间矢状轴宽度和近端冠状轴宽度均明显下降(P<0.01或P<0.05);皮质骨BMD和Tb.Th均明显下降(P<0.05),松质骨BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.Sp和Tb.N均明显下降(P<0.05或P<0.01);HE染色结果和AKP染色结果均明显下降。(2)与NC组相比,TC组小鼠血清中AKP活力明显下降,钙离子浓度和磷离子浓度显著上升(P<0.01或P<0.05);骨中LncRNA MEG3、PI3K、Akt、mTOR和NF-κBmRNA表达均明显上升,miR-16和Runx2mRNA表达均显著下降(P<0.01或P<0.05);Akt、mTOR和p62蛋白表达明显上调,Runx2蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。(3)与TC组相比,TG组小鼠体重出现显著性下降;胫骨湿重明显上升(P<0.05),皮质骨BMD明显上升(P<0.05),松质骨BMD、BV/TV和Tb.N均显著上升(P<0.05);HE染色结果和AKP染色结果均明显上升。TP组小鼠体重出现显著性下降;胫骨湿重、胫骨长度和中间矢状轴宽度均显著上升(P<0.05);皮质骨BMD、BV/TV和Tb.Th明显上升(P<0.05),松质骨BMD、BV/TV和Tb.N均显著上升,Tb.Sp明显下降(P<0.05);HE染色结果和AKP染色结果均明显上升。与TG组相比,TP组小鼠胫骨中间矢状轴宽度明显上升(P<0.05);松质骨BMD和Tb.N显著上升,Tb.Sp显著下降(P<0.05);HE染色结果和AKP染色结果明显上升。(4)与TC组相比,TG组小鼠血清中磷离子浓度和钙离子浓度显著下降(P<0.05);骨中miR-16和Runx2mRNA表达均显著上升,mTORmRNA表达明显下降(P<0.05);Runx2蛋白表达显著上升,p62蛋白表达显著下降(P<0.05)。TP组小鼠血清中AKP活力显著上升,磷离子浓度显著下降(P<0.05);骨中LncRNA MEG3、PI3K、mTOR和NF-κBmRNA表达明显下降,miR-16和Runx2mRNA表达均显著上升(P<0.05);Akt、mTOR和p62蛋白表达明显下调,Runx2蛋白表达显著升高(P<0.05)。与TG组相比,TP组小鼠血清中AKP活力显著上升(P<0.05);骨中LncRNA MEG3、PI3K和mTORmRNA表达明显降低,Runx2mRNA表达明显上升(P<0.05);TP组小鼠骨中p62蛋白表达显著下降,Runx2蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:(1)T2DM 小鼠骨中 LncRNA MEG3/p62/Runx2 被激活后,LncRNA MEG3 表达上调,激活p62,进而抑制骨自噬,抑制成骨分化和骨形成代谢。(2)下坡跑运动和高强度间歇性运动均能促进T2DM小鼠骨形成,且前者效果优于后者,其作用机制可能是运动可能通过下调LncRNA MEG3表达,负向调控其下游miR-16,进而抑制PI3K/Akt/mTOR通路,通过mTORC1增强骨自噬,下调p62和NF-κB表达,最终使Runx2表达增加,促进骨形成。