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课题前期为克服10-羟基喜树碱（10-Hydroxycamptothecine,10-HCPT）水溶性和稳定性较低,靶向性较差,易产生耐药性以及临床用羟基喜树碱注射液（M-HCPT）代谢快等缺点,从改变剂型及联合用药方面为切入点,制备了10-羟基喜树碱-粉防己碱复方脂质体（10-Hydroxycamptothecin–Tetrandrine complexes liposome,Lp-10-HCPT-TET）,且对脂质体的制备工艺、制备方法和体内抗肿瘤效果进行研究。本课题进一步对Lp-10-HCPT-TET的制备工艺进行优化。建立了高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS）对Lp-10-HCPT-TET的药代动力学特征和组织分布进行研究,深入探讨其体内吸收、分布和消除的规律。为Lp-10-HCPT-TET在临床用药安全性和用药监测提供参考依据。本文主要从剂型优化、体内药物药代动力学和组织分布这几方面对Lp-10-HCPT-TET进行深入研究,具体内容如下:（1）建立高效、灵敏的液相色谱仪串联三重四级杆质谱仪（LC-QQQ-MS/MS）分析方法,同时对Lp-10-HCPT-TET中的10-HCPT和TET进行体内含量测定和药代动力学的初步研究。以SD大鼠尾静脉注射Lp-10-HCPT-TET（0.5mg/kg）后眼眶取血,血浆样品的前处理是采用一步蛋白沉淀法,甲醇作为沉淀溶剂。采用C18超高液相色谱柱（2.1毫米×100毫米,2.1μm）,流动相为10:90的10mM醋酸铵溶液（A）和乙腈（B）,等度洗脱,流速是0.5 mL·min-1。以喜树碱为内标（IS）。采用阳离子扫描模式下的多反应监测模式,10-HCPT的m/z 365.1→321.0,TET的m/z623.2→280.9和CPT的m/z 349.2→305.1。对Lp-10-HCPT-TET组和10-HCPT-TET溶液组中的10-HCPT和TET分别绘制平均血药浓度药时曲线、计算相关药动学参数。研究结果显示,所建立的高效液相色谱串联三重四级杆质谱（LC-QQQ-MS/MS）的测定方法灵敏度高,专属性强。10-HCPT和TET中的线性范围分别为0.55-309 ng·mL-1和0.72-194 ng·mL-1;10-HCPT和TET的LLOQ分别为0.2 ng·mL-1和0.5 ng·mL-1。大鼠血浆中QC样品日内、日间的精密度和准确度均在15%以下。10-HCPT平均回收率为98.12%,TET平均回收率为97.26%。无明显基质效应。该方法得到了充分验证,并成功地应用于比较原剂型和复方脂质体的药代动力学。药代动力学参数结果显示,10-HCPT在原剂型中迅速消除,1h内可快速吸收,主要药代动力学参数差异有统计学意义（P<0.05）。根据MRT、T1/2和CL的药代动力学参数,Lp-10-HCPT-TET能延长10-HCPT在体内的保留和循环时间,达到良好的缓释效果。据现有报道所知,Lp-10-HCPT-TET在大鼠体内的药代动力学特性尚未见报道,研究为相关药物的药代动力学研究提供了指导。（2）建立各组织部位中10-HCPT和TET的检测方法并进行方法学验证,对Lp-10-HCPT-TET在各组织分布情况进行研究。将Lp-10-HCPT-TET、10-HCPT注射液和TET溶液分别以3mg/kg的剂量尾静脉注入老鼠体内,于不同时间点将小鼠颈椎脱臼,摘取心、肝、脾、肺、肾各组织,匀浆后采用一步蛋白沉淀法对组织样品进行前处理,制备各组织样品。采用高效、灵敏的液相色谱仪串联三重四级杆质谱仪（LC-QQQ-MS/MS）为检测手段,以超高效液相色谱柱（2.1mm×100mm、2.1μm）为色谱柱;以10mM的醋酸铵溶液和乙腈为流动相,等度洗脱。采用正离子扫描模式检测各组织样品,探讨Lp-10-HCPT-TET中的10-HCPT和TET在体内的组织分布情况。研究结果显示,经特异性、标准曲线和最低定量限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应等方法学考察达到相关要求;组织分布结果显示,复方脂质体组与注射液对照组的10-羟基喜树碱在肝脏均有较多分布,但复方脂质体组的10-羟基喜树碱在肝组织的AUC-、MRT都显著高于注射液组（P<0.01）;与粉防已碱注射溶液在其他脏器组织的分布比较,复方脂质体组也增加了在肝和脾的分布,显著减少了在肾及肺的分布,肝部位的AUC0-值显著高于注射液组（P<0.01）。研究结果揭示10-羟基喜树碱-粉防己碱复方脂质体提高了10-羟基喜树碱在肝脏组织中的浓度,增加了积累,延长了药物的作用时间,粉防已碱在肝组织的分布也有利于发挥其抗肿瘤多药耐药作用,进一步提高药物对肝肿瘤治疗的有效性,降低药物毒性,延缓肾排泄,达到提高疗效的作用。该研究为进一步体内抗肿瘤的药效学研究奠定了良好基础。（3）本文在前课题基础上,采用薄膜分散法分别将10-HCPT和TET包入脂质体中,并经过共同水化,制备Lp-10-HCPT-TET;通过加入不同量的吐温80和油酸,采用纳米粒度仪对粒径和电位测定考察;建立高效液相色谱-高速离心法对Lp-10-HCPT-TET的包封率进行测定。结果显示,加入10mg油酸量对Lp-10-HCPT-TET的粒径最为合适,平均粒径约为120nm,电位值为-21.5mV;吐温80对Lp-10-HCPT-TET的粒径和电位未能产生积极影响。并改进方法后,测得10-HCPT和TET的包封率分别90%和87%。