DNAzyme（脱氧核酶）作为一种人工合成的序列自被发现以来，因其高效的催化活性和结构识别能力，已被逐渐开发应用于生物分子检测领域。本论文通过研究已报道过的DNAzyme，对其序列进行碱基替换，构建了Mg2+依赖性的DNAzyme，在此基础上，结合了荧光分子信标，实现了体外对金属离子和蛋白酶的高灵敏度检测，并在复杂样本中也取得了成效，此外，还探讨了一些药物对DNAzyme催化效率的影响。　　本文的主要研究内容如下：　　1.基于DNAzyme和rGO实现对铅离子的超灵敏检测　　在该体系中，我们设计了一条含有RNA碱基的单链荧光探针，并利用rGO（还原性氧化石墨烯）对不同长度DNA链的吸附特性以及rGO的荧光淬灭能力，构建了一个对Pb2+的超灵敏检测体系。首先，我们在不同pH，温度和探针浓度下进行试验，选出了DNAzyme活性最高的条件。此外，为了提高检测限，我们选取荧光淬灭效率较高的rGO作为荧光淬灭平台，同时我们对其用量进行了优化并与普通GO产生的效果进行对比。结果发现：（a）要使荧光探针完全淬灭需要10μg/mL的GO，而使用rGO时只需要不到4μg/mL，且使用rGO时，不加入DNAzyme与加入DNAzyme的信号差值更大；（b）通过这种方法检测Pb2+的检测下限为100pM，具有非常优秀的灵敏性；（ c）用此方法在血清中检测Pb2+，检测限可以达到500pM(0.1μg/L)，低于人体内的正常血铅范围(＜99μg/L)。　　2.构建Mg2+依赖性的DNAzyme，使用双标发夹探针实现对RNase H活性检测及其在复杂样本中的应用　　该体系中，首先我们在已报道过的Pb2+依赖性的DNAzyme的序列上进行碱基的替换，成功使得该Pb2+依赖性的DNAzyme转变成Mg2+依赖性的DNAzyme，而且对Mg2+有着高度特异性。这种Mg2+依赖性的DNAzyme可以将我们设计的双标发夹型探针打开，我们将该DNAzyme序列嵌入一个发夹型的DNA-RNA嵌合链中以抑制其活性。接着，利用RNase H（核糖核酸酶H）切割DNA-RNA杂交链的特性将DNAzyme释放出来并恢复活性。通过这种活性“开关”建立了对RNase H活性检测体系。结果表明：（a）该体系对RNase H检测下限为0.01U/mL，并且在血清环境中及细胞提取液中均能进行检测；（b）研究了11种不同天然药物对RNase H的影响，结果发现这11种药物对RNase H均有激活作用，并具有浓度依赖性；（c）分析了6种抗生素对DNAzyme催化效率的影响，发现庆大霉素和硫磺链霉素对DNAzyme催化活性有一定的抑制作用；（d）该体系还可以对Mg2+和DNAzyme进行检测，其中，对Mg2+的检测下限为5nM，对DNAzyme的检测限为5pM。