该研究从细胞生物学和流行病学两个方面分三个部分对其进行研究:1.乙肝病毒表面抗原作为单病原负荷对血管内皮细胞与单核细胞相互作用的影响:该部分研究首先通过间接免疫荧光试验确认HBsAg与血管内皮细胞的粘附现象;然后,选择整合有HBV全基因组的HepG2.2.15细胞的上清及HBV的主要结构成份—乙肝病毒的表面抗原(HBsAg),分别与人脐静脉血管内皮细胞株ECV-304和单核细胞株THP-1进行孵育,检测其对这两种细胞的粘附和趋化功能的影响;并进一步检测孵育后ECV-304细胞中与AS相关的部分趋化因子的表达.从免疫学、细胞生物学角度研究了HepG2.2.15细胞上清或乙肝病毒的表面抗原作为单病原负荷,对血管内皮细胞与单核细胞相互作用的可能影响.2.乙肝病毒表面抗原在多病原负荷时对血管内皮细胞与单核细胞相互作用的影响:为了进一步研究HBV及其结构成份在多病原负荷状态下,是否会对血管内皮细胞与单核细胞的相互作用产生同样影响.该部分引入了细菌源性感染因子LPS,探讨双病原负荷状态下,HBV及其结构成份对单核细胞与血管内皮细胞相互作用的影响.以LPS作用后的脐静脉内皮细胞ECV-304作为应激状态细胞模型,在此基础上,进行粘附及趋化功能的检测.结果表明,在应激状态下,HepG2.2.15细胞上清或HBsAg作用于脐静脉内皮细胞ECV-304,不能显著影响其对单核细胞的趋化及粘附活性,而HBsAg作用于单核细胞THP-1,其不仅维持了其作为单病原负荷时,增加单核细胞粘附的特性(粘附细胞百分率依然维持在约40﹪),还可显著抑制应激状态下,ECV-304对THP-1的强趋化作用(趋化细胞百分率由约16﹪降至3﹪).进一步在mRNA水平检测与HBsAg孵育后的THP-1,结果显示,多个趋化因子受体水平显著下调.3.乙型肝炎感染与动脉粥样硬化发病相关性的血清流行病学研究:为进一步澄清HBV在人群中的动脉粥样硬化发病中是否发挥作用.我们收集了共446例行冠脉造影术的患者,根据冠脉造影结果将其分为冠脉狭窄组和非狭窄组,并用2复旦大学硕士论文ELISA方法检测患者血清中的乙肝病毒感染两对半指标及CRP水平,从血清流行病学角度探讨HBV感染的血清学指标、病毒载量和冠状动脉粥样硬化的发生及冠脉狭窄程度之间的关系;分析了HBV感染与其它动脉粥样硬化传统风险因子之间可能存在的交互作用;并进一步研究了炎症水平对HBV感染与动脉粥样硬化关系的影响.综上所述,我们的研究表明,HBsAg可以影响体外单核细胞与血管内皮细胞的相互作用,在单个和多个病原负荷存在时,这种影响基本是一致的,即:HBV及其结构成份既可增加单核细胞对血管内皮的粘附又可抑制血管内皮细胞对单核细胞的趋化,这种抑制作用在多重病原负荷状态下尤为明显.但我们的结果并不支持HBV感染与动脉粥样硬化存在流行病学相关性.这表明HBV感染作为多重感染的一支,其参与动脉粥样硬化发生的机制十分复杂,有待进一步研究.