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目的对比Lewis肺癌细胞(LLC)及LLC原位接种后获得的第一代衍生细胞和原位接种后获得的第二代衍生细胞间的生物学特性,比较衍生细胞系与LLC细胞分别在原位种植模型中的侵袭转移能力。方法1.建立C57 BL/6小鼠Lewis肺癌原位种植模型。2. Lewis肺癌衍生细胞系的建立。3.离体实验:1)荧光显微镜及电镜下观察细胞形态。2)cck8法测细胞增殖能力。3)细胞克隆形成实验。4)Transwell侵袭实验。4.活体实验:1)原位种植模型与皮下种植模型的比较。2)细胞接种数量对成瘤与转移的影响。3)第一及第二代衍生细胞系与亲代细胞间成瘤与转移的对比。5.药物抑制实验:小鼠成瘤的药物抑制实验。结果1.第一代及第二代衍生细胞系与LLC细胞细胞均呈梭形生长,荧光显微镜下均能稳定表达GFP,电镜下细胞均表达出不同程度的肺腺癌细胞的特征。2.细胞系之间的增殖能力无明显差异(p>0.05)3.侵袭能力第二代衍生细胞系>第一代衍生细胞系>LLC(p<0.05)。4.活体实验显示:1)接种相同数目细胞的原位组较皮下组有更高的成瘤率和转移性。2)随着原位种植细胞数目的增加,小鼠成瘤率明显增高。3)通过体内多次传代的衍生细胞株在原位种植模型中的成瘤率和转移性较强,依次为:LLC-R2-Lung> LLC-R1-Lung> LLC-P。5.顺铂与紫杉醇合并组的化疗效果要明显优于顺铂和紫杉醇单用组。结论通过离体和活体实验,我们发现随着体内传代次数的增加,细胞的侵袭转移能力大大增强,而这部分侵袭转移能力较强的细胞,在肿瘤的发展进程中起了很大的促进作用。通过比较皮下和原位种植模型,表明原位种植模型能更准确的模拟临床病人的侵袭转移途径,为肺癌的进一步研究提供了模型基础。在药物治疗中,我们的原位种植模型是可以明显观察出药物的疗效的,为肺癌的药研提供了基础。