哈茨木霉（Trichoderma harzianum）M3菌株是西瓜枯萎病病原菌尖镰孢菌西瓜专化型（Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON）的生防菌。哈茨木霉可与病原菌竞争空间和营养,通过分泌抑菌酶如几丁质酶（Chitinase,CHIA）、β-1,3-葡聚糖酶（β-1,3-Glucanase,GA）等溶解病原菌细胞壁,从而有效防控病害。酚酸是根分泌物的主要成分,连作可使其在土壤中积累并影响植物生长和根区微生物的生存与竞争。因此,在连作西瓜田中,酚酸对生防哈茨木霉拮抗能力的影响决定了其防病效果。本研究旨在明确西瓜根分泌物中的主要酚酸物质,并对其影响哈茨木霉分泌CHIA、GA及菌株的根内定殖进行探究,研究结果将为连作环境西瓜枯萎病的生物防治提供理论依据。主要研究结果如下:1.采用高效液相色谱-质谱（LC-MS）技术和气相色谱-质谱（GC-MS）技术对西瓜根分泌物的主要成分进行分析鉴定。结果表明,LC-MS检测出西瓜根分泌物中的10种主要酚酸,其质量分数由多到少依次为肉桂酸（Cinnamic acid,RGS）、阿魏酸（Ferulic acid,AWS）、香草酸（Vanillic acid,XCS）、丁香酸（Syringic acid,DXS）、苯甲酸（Benzoic acid,BJS）、对羟基苯甲酸（p-Hydroxybenzoic acid,QBS）、水杨酸（Salicylic acid,SYS）、邻苯二甲酸（Phthalic acid,LBS）、没食子酸（Gallic acid,MZS）和对香豆酸（p-Coumaric acid,XDS）。GC-MS 检测出西瓜根分泌物中的42种成分,分别为有机酸类6种、醛类7种、酮类3种、酯类5种、胺类4种、醇类4种、烃类5种、酚类3种和其他化学物质5种。故LC-MS技术适用于西瓜根分泌物中酚酸物质的鉴定。2.在明确西瓜根分泌物中酚酸种类和浓度的基础上,采用液体培养法和紫外光度计法,分别检测0、1、12.5、25、50 μmol·L-1的10种酚酸与FON对M3菌株CHIA和GA的影响。结果表明:10种酚酸和FON对M3菌株的2种酶活均有显著促进作用,且随着酚酸浓度增加而增加,但是不同酚酸的促进作用有差异,为QBS＞BJS＞LBS＞AWS＞XCS＞DXS＞RGS＞SYS＞MZS＞XDS,其中50 μmol·L-1 QBS的促进作用最强,2种酶活性较CK1（M3孢子悬液+生理盐水处理）分别增加732.45%和1185.09%。FON+酚酸处理（FON+P）与单加酚酸处理比较,二者促进酶活性的趋势相似但幅度不同。FON+P的酶活性更高,其中FON+50μmol·L-1 QBS处理的2种酶活性最高,分别为25.46U·mL-1 和 21.38U·mL-1,较 CK2（M3+FON+生理盐水）增加 406.16%和 458.22%。说明M3菌株能够分泌CHIA和GA用于抑制FON,环境中酚酸积累和病原菌存在都对M3菌株抑菌酶的产生具有促进作用。3.基于M3菌株和FON基因序列分别构建2菌株的实时荧光定量PCR技术。通过退火温度、引物序列和引物浓度等反应条件优化,获得特异性较好,灵敏性较高的反应体系。当真菌起始DNA浓度在0.001～100 ng·μL-1范围时,M3菌株和FON的DNA浓度对数值与循环数（Ct值）呈现良好的线性关系,适用于M3菌株和FON在植株根内定殖的研究。4.采用实时荧光定量PCR和盆栽试验,研究10种酚酸与FON对M3菌株在西瓜苗根内定殖的影响。结果表明,接种第10 d,所有根内都定殖了 M3菌株和FON。单一酚酸处理,10种酚酸均抑制M3菌株的根内定殖,其中25μmol·L-1 MZS、BJS和50 μmol·L-1 XDS的M3菌株定殖量最低,抑制作用最强;FON+P处理,M3菌株定殖量进一步降低,其中50μmol·L-1 QBS和12.5μmol·L-1 LBS、BJS的M3菌株定殖量最低,抑制作用最强。FON菌株在西瓜苗根内定殖量随着时间增加而减少,其中25 μmol·L-1 RGS和12.5 μmol·L-1 XCS、QBS对FON的抑制作用最强。酚酸累积以及酚酸与FON共同作用均可降低M3菌株的防治效果。因此土壤中酚酸积累与FON共同作用显著抑制M3菌株在西瓜幼苗根内的定殖,从而影响生防哈茨木霉对西瓜枯萎病的防治效果。