【摘 要】
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目的:1.基于前期高通量测序研究结果,进一步通过动物实验探讨益气化痰活血方通过干预Th17细胞分化相关细胞因子进而缓解AIT免疫异常,为其有效防治AIT提供充分的实验依据。2.通过对从脾论治AIT的方药进行数据挖掘,分析其高频中药、四性、五味、归经及药物组成,发掘潜在新处方,为后续研究提供处方依据。材料与方法:1.采用猪甲状腺球蛋白佐剂注射CBA/J小鼠建立AIT模型小鼠,造模成功后,随机分为模型
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目的:1.基于前期高通量测序研究结果,进一步通过动物实验探讨益气化痰活血方通过干预Th17细胞分化相关细胞因子进而缓解AIT免疫异常,为其有效防治AIT提供充分的实验依据。2.通过对从脾论治AIT的方药进行数据挖掘,分析其高频中药、四性、五味、归经及药物组成,发掘潜在新处方,为后续研究提供处方依据。材料与方法:1.采用猪甲状腺球蛋白佐剂注射CBA/J小鼠建立AIT模型小鼠,造模成功后,随机分为模型组（MG）、益气化痰活血方低剂量组（YG-1）、中剂量组（YG-2）、高剂量组（YG-3）,亚硒酸钠组（Se G）,每组10只。正常组（NG）与MG组小鼠给予双蒸水,其余各组给予不同处理因素灌胃,连续灌胃给药8周。8周后取材,ELISA检测小鼠血清TGAb浓度;HE染色检测小鼠甲状腺淋巴细胞浸润情况;RT-PCR检测各组小鼠甲状腺组织IL-1β、IL-21、IL-23R、JAK2、STAT3、RORγt、RORα和IL-17m RNA基因表达水平。2.通过计算机检索中国知网（CNKI）、维普资讯中文科技期刊数据库、万方医学数据库、Pubmed数据库,根据纳排标准筛选从脾论治AIT的中药复方文献,建立数据库,提取资料,对数据进行规范清洗和处理后,运用Microsoft Excel、SPSS Modeler 18.0及SPSS 26.0软件进行统计分析,对从脾论治AIT的用药规律进行分析总结。结果:第一部分:1.NG组甲状腺滤泡丰富,排列紧密。MG组甲状腺滤泡大小不等,滤泡间间质增生,滤泡分散排列,间质可见淋巴细胞浸润。Se G组甲状腺滤泡间质疏松,偶见淋巴细胞浸润。YG组甲状腺滤泡上皮细胞较为完整,胶质含量略减少,滤泡结构完整。与MG组相比,YG组甲状腺组织淋巴细胞浸润情况均得到缓解,其中,YG-2组较YG-1、YG-3组甲状腺组织淋巴细胞浸润面积明显降低。2.与NG组相比,MG组小鼠TGAb明显升高（P＜0.05）;与MG组相比,YG-2、YG-3组小鼠血清TGAb水平显著降低（P＜0.05）;与Se G组相比,YG-2、YG-3组小鼠血清TGAb水平显著降低（P＜0.05）。3.与NG组比较,MG组IL-21、IL-23R、JAK2、RORα和IL-17m RNA表达上调（P＜0.05）;与MG组比较,Se G组IL-23R和RORγtm RNA表达下调（P＜0.05）;YG-1组IL-21、IL-23R、JAK2、STAT3和IL-17m RNA表达下调（P＜0.05）;YG-2组IL-1β、IL-21、IL-23R、RORγt和IL-17m RNA表达下调（P＜0.05）;YG-3组IL-1β、IL-21、IL-23R、RORα、RORγt和IL-17m RNA表达下调（P＜0.05）。与Se G组比较,YG-1组STAT3表达下调（P＜0.01）;YG-2组IL-17表达下调（P＜0.01）;YG-3组RORα表达下调（P＜0.01）。第二部分:1.本研究最终纳入从脾论治AIT文献106篇,共计135味中药。2.从脾论治AIT处方中,药物总使用频次为1248次,黄芪、茯苓、夏枯草、白术、柴胡为常用药物。3.处方中频数最高的药类为补虚药及清热药,分别占药物总频次39.26%、14.18%。处方中常用药性为寒性、温性,常用药味为甘味、苦味。药物入脾经者最多,其次为肺经、肝经。4.关联规则中,药对茯苓-陈皮支持度最高,黄芪-玄参置信度最高,药组茯苓、柴胡-白术支持度最高,黄芪、玄参-夏枯草置信度最高。5.通过聚类分析后可将高频药物（频数≥10）划分为3个组方,组方一:白术、茯苓、陈皮、白芍、当归、香附、川芎、黄芩、柴胡、莪术、三棱、半夏;组方二:山药、太子参、淫羊藿、仙茅、肉桂、山茱萸、熟地黄、郁金、牡丹皮;组方三:黄芪、党参、甘草、夏枯草、玄参、浙贝母、白花蛇舌草、牡蛎。结论:1.益气化痰活血方可降低AIT小鼠血清TGAb水平、减轻甲状腺淋巴细胞炎症浸润,缓解AIT免疫失衡,其机制可能与下调IL-1β、IL-21、IL-23R、JAK2、STAT3、RORγt、RORα和IL-17m RNA基因表达有关。2.临床上从脾论治AIT时,常使用黄芪、茯苓、夏枯草、白术、柴胡等中药,“健脾益气”为主要治法,贯穿治疗全程,常配合疏肝、益肾、化痰散结法治疗。
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