【摘 要】
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目的探讨肌肽（camosine,CAR）对缺糖缺氧/复糖复氧（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）引起星形胶质细胞（astrocyte,AS）损伤的保护作用,并阐明其机制。方法分离新生24h SD大鼠大脑皮质,培养并纯化AS后,随机分为对照组（Control组）、模型组（OGD/R 组）、OGD/R+CAR 组（1.0、3.0、9.0mmol/
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目的探讨肌肽（camosine,CAR）对缺糖缺氧/复糖复氧（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）引起星形胶质细胞（astrocyte,AS）损伤的保护作用,并阐明其机制。方法分离新生24h SD大鼠大脑皮质,培养并纯化AS后,随机分为对照组（Control组）、模型组（OGD/R 组）、OGD/R+CAR 组（1.0、3.0、9.0mmol/L）。免疫荧光GFAP染色法测定细胞纯度;倒置显微镜观察细胞形态;噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活率;比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）的漏出率;Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞内的活性氧（ROS）含量;免疫荧光检测Phospho-Nrf2（S40）的入核水平;Western blotting法检测Nrf2总蛋白以及Phospho-Nrf2（S40）蛋白表达;qPCR 法检测 HO-1、NQO1 mRNA 含量。结果与对照组相比,OGD/R的细胞形态出现异常,活力明显降低（P＜0.01）,LDH漏出及细胞凋亡率显著增多（P＜0.01）,细胞内ROS生成明显增加（P＜0.01）,AS核内Phospho-Nrf2（S40）含量及其下游产物HO-1、NQO1 mRNA表达量下调（P＜0.01）。与 OGD/R组相比,OGD/R+CAR 组（1.0、3.0、9.0mmol/L）细胞形态均有不同程度好转,细胞活力明显升高（P＜0.01）,LDH漏出及细胞凋亡率减少（P＜0.01）,细胞内ROS生成不同程度减低（P＜0.01）,AS核内Phospho-Nrf2（S40）含量及其下游产物HO-1、NQO1 mRNA表达量上调（P＜0.01）。结论肌肽可通过抑制OGD/R诱导ROS释放,避免过度激活Nrf2-ARE通路,进而增强其下游抗氧化酶HO-1、NQO1 mRNA的表达,来对AS发挥保护作用。
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