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arresten是新近发现的血管抑制剂。对于它的作用存在两种不同的意见：一者认为它对血管内皮细胞增殖的抑制作用甚至比endostatin强；一者则认为它即使有这种作用，也是很弱。但是，上述双方均是以原核表达的arresten为研究对象，存在蛋白的翻译后加工及修饰的不完善，从而可能造成其活性改变，这使得这种争论变得含混不清。作为一种人体内源性蛋白片段，我们认为以真核表达的arresten为对象进行研究更加合理。本研究的构思就是基于此背景。 目的：构建arresten cDNA的分泌型真核表达载体，将其转染人胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803及人乳腺癌细胞株MCF-7。收集含arresten的细胞培养上清，验证arresten体外抑制血管内皮细胞生长的活性，同时了解此基因转染对于肿瘤细胞的自身增殖有无影响。最后，通过裸鼠成瘤实验探讨arresten对上述肿瘤生长的作用。 方法：利用PCR法将小鼠Igκappa链信号序列的60个碱基拼接至arresten军医进修学院硕一卜学位论文中文摘要cDNA的氨基端，并克隆入真核表达载体详DNA3.1(+)。然后以脂质体法将重组peDNA3 .1(+)一arresten转染至SGC一7901、MGC一803、MCF一7细胞，观豁专染肿瘤细胞的生物学特，叼苗绘生长曲线、流式细月刨义检测细胞周期)，并以Westemblot检测培养上清中。sten的分泌表达。进一步提取上述三种细胞的培养上清，采用内皮细月参曾殖习印制落划全险测其所含毗夙en活性。最后，通过建立三种转基因肿瘤细胞的裸鼠移植瘤模型，观察肿瘤的生长情况。结果:成功构建了二sten的分泌型真核表达载体，获得可表达二stell的SGC一7901、MGC一803、MCF一7细胞株，真核表达的an℃Sten对血管内皮细刀刨曾殖有一定的抑制作用，转基因的SGC一7901、MGC一803移植瘤生长减缓。结论an’esten可在一定程度上抑制血管内皮细月参曾殖。同时，这种机制很可能是人胃癌细月色眯SGC一7901、MGC一803移枷留生长受到影响的原因。arrestellcDNA真核表达载体的成功构建及其转导至人体细胞可行胜的确认为进一步的针时人类肿瘤的才危血管基因治疗研究莫定基汗出。