【摘 要】
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目的：探讨Hsv-tk/GCV自杀基因系统联合60Co-γ射线治疗对人胶质瘤细胞系u25l的杀伤作用，并探讨其可能的机制。方法：1.取滴度为4.O×104cFU/ml HsV-tk的病毒上清液感染胶质瘤细胞系U25l，经G418阳性筛选，PCR鉴定U25l/TK细胞，转染与未转染tk基因的U251细胞按2：8混合，用于体外实验。2.实验分为对照组、GCV组、单纯放射治疗组及GCv联合放射治疗组。G
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目的：探讨Hsv-tk/GCV自杀基因系统联合60Co-γ射线治疗对人胶质瘤细胞系u25l的杀伤作用，并探讨其可能的机制。
方法：1.取滴度为4.O×104cFU/ml HsV-tk的病毒上清液感染胶质瘤细胞系U25l，经G418阳性筛选，PCR鉴定U25l/TK细胞，转染与未转染tk基因的U251细胞按2：8混合，用于体外实验。2.实验分为对照组、GCV组、单纯放射治疗组及GCv联合放射治疗组。GCV的药物浓度为其IC50的10％(0.2uM)，加药48h后放射治疗。放射治疗组剂量(Gy)为2、3、4、6、8、10、10.5×2、1.3×3.MTT法检测各组细胞OD值及细胞存活分数，观察HSV-tk/GCV系统对U25l的辐射增敏作用。4.细胞克隆形成实验检测各组细胞集落形成率，观察HSv-tk/GCV系统联合不同分割方式60Co-Y叫射线对U25l细胞增殖的影响。同时用流式细胞术检测其对U25l细胞凋亡的影响。
结果：1.U25l/TK混合细胞经10％的IC50(GCV)处理后，再联合2、4、6、8、lOGy分割剂量的60Co吖射线照射，细胞存活分数分别为66.6±0.8、51.7±0.734.0±1.4、24.2±0.5、13.5士1.1，与单纯放射治疗(81.8±1.5、67.2±1.1、48.8±1.5、32.9±12、237±0.7)相比，各剂量点问差异均有显著性(P<0.05)。2.各剂量点的增敏比分别为1.83、1.47、1.29、1.13、1.13，2Gy的放射增敏效应最为明显。3.当给予超分割放疗(1.5Gy×2、1.3Gyx3，分次照射间隔4-6小时)时，U25l细胞的存活分数分别为49.6±1.8、31.9±4.6，与超分割联合HSv-tk/GCVV系统的细胞存活分数(37.6±3-2、23.8±4.6)相比，两组之间差异有显著性(P<0.01)。组内分析发现l.3 Gyx3照射后，对LJ25l细胞存活分数的影响显著高于1.5 Gyx2组(P<0.01)。4.各组细胞凋亡率检测结果显示，超分割照射方式凋亡率显著高于常规分割照射方式(P<0.01)；联合HSV-tk/GCV系统后，细胞凋亡率显著高于单纯放射组(P<0.01)，且以超分割照射方式最为明显。
结论：1.非常规分割放疗是治疗胶质瘤较理想的模式，1.3Gy×3的分割照射模式最为理想。2.HSV—tk/GCV系统对人胶质瘤细胞系IJ251具有放射增敏作用。3.HSV—tk/GCV系统增敏机制可能是通过抑制细胞的亚致死性修复，诱导U251细胞的凋亡。
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