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目前,MDSCs的研究存在许多热点问题,体外细胞培养中的纯化、扩增、定向分化等难题尚在探索中。人们在探讨适宜的干细胞培养条件的同时,特别关注生物活性因子对干细胞增殖的影响。bFGF和CNTF作为生物活性因子的成员,因其生物活性的多效性而备受基础与临床研究的重视。本文进行的有关研究,旨在进一步探讨成体干细胞的培养条件,为有关研究与应用奠定实验基础。本实验通过酶消化法分离大鼠MDSCs,然后用密度梯度离心法和差速贴壁法纯化获取MDSCs,进行体外原代和传代培养。并通过免疫细胞化学法(desmin、Sca-1)对所获得的细胞进行鉴定。通过MTT比色法检测不同浓度(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00ng/ml)的bFGF和CNTF单独应用96h以及二者(100.0ng/ml)联合作用24h、48h、72h和96h对MDSCs增殖的影响。MTT的OD值显示:1.与阴性对照组比较,除6.25(ng/ml)组外,12.50ng/ml至100.00ng/ml实验组的MDSCs均有明显的增殖(P<0.05)。在6.25ng/ml至50.00ng/ml期间,MDSCs的增殖随bFGF和CNTF浓度升高而显著增强(P<0.05)。2.在6.25ng/ml至50.00ng/ml期间,bFGF与CNTF对MDSCs的促增殖作用没有明显差异(P>0.05)。随其浓度升高,在50.00ng/ml时,bFGF对MDSCs的促增殖作用明显低于CNTF组,并存在显著性差异(P<0.05)。但50.00ng/ml组促增殖作用接近顶峰,与100.00ng/ml组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.bFGF和CNTF的促增殖效应随培养时间的延长而逐渐明显,但促增殖作用的显效时间有明显差异。与阴性对照组比较,出现显著促增殖效应的时间(P<0.05)分别为:bFGF单独作用96 h、CNTF单独作用72h、二者联合应用48h。实验组在24h内尽管MDSCs数量增多,但没有显著性差异(P>0.05)。4.在48h-96h期间,bFGF和CNTF联合组促进增殖的作用最强,并与其它实验组间存在显著差异(P<0.05)。本实验提示:bFGF和CNTF均可促进体外培养的大鼠MDSCs增殖,而且具有协同增效作用。但是,bFGF和CNTF促进MDSCs增殖作用具有显效时间的差异性,而且在12.5-50ng/ml期间,促MDSCs增殖作用还呈浓度依赖性。