目的：　　本课题通过观察大鼠胸主动脉的肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶C（PKC）、蛋白激酶A(PKA)的表达水平，及各组大鼠血管内皮细胞光镜和电镜下的变化，探讨 MLCK信号通路在糖尿病血管内皮细胞中的调控作用，旨在揭示抵挡汤早期干预可以通过介导 MLCK信号通路改变血管内皮细胞通透性，为临床预防糖尿病大血管并发症提供新的思路及理论依据。通过观察抵挡汤早、中、晚组实验疗效的不同，进一步诠释中医治未病思想。　　方法：　　1.动物造模　　选取健康的SD雄性大鼠150只，适应性饲养1周后，从中随机抽取20只作为空白对照组，给予普通饲料喂养，剩余130只作为造模组，给予高脂饲料喂养。8周后，内眦静脉取血，检测空腹血糖(FBG)和血清胰岛素水平(Ins)。在造模组大鼠中随机选取20只作为抵挡汤早期干预组，第8周开始给予抵挡汤灌胃，12周后开始造模。动物出现胰岛素抵抗后，除空白对照组予以相同剂量的枸橼酸缓冲液外，其余大鼠均予以链脲佐菌素（STZ）30mg/kg尾静脉注射。3天后于大鼠尾静脉处采血检测随机血糖，若血糖高于16.7mmol/L，则为造模成功。前期实验成模116只（成模率约89％），除抵挡汤早期干预组（造模前4周给药），其余大鼠按体重、血糖分层随机分成糖尿病组、抵挡汤中期给药组（成模时给药）、抵挡汤晚期给药组（成模后4周给药）、二甲双胍组、辛伐他汀组。　　2.检测指标　　于24周将大鼠处死，取其胸主动脉组织，存放于冻存管内，备用。用Western-Blot方法检测MLCK的表达水平；实时荧光定量PCR方法检测cAMP、PKC、PKA的表达水平的变化，HE染色后观察各组大鼠胸主动脉形态学结构变化，并在电镜下观察血管内皮细胞及内皮细胞间连接的超微结构。　　结果：　　（1）成模后，与空白对照组比较，造模组体重和血糖明显升高，胰岛素敏感指数降低。与糖尿病组比较，抵挡汤早、中干预组cAMP、PKA均升高，MLCK、PKC表达下降，有显著差异（P<0.05）；与抵挡汤晚期干预组比较，抵挡汤早期干预组 cAMP、PKA、MLCK、PKC改变更为明显，差异有统计学意义（P<0.05）；抵挡汤早期干预组与辛伐他汀组比较，无显著差异（P>0.05）。　　（2）观察主动脉组织HE染色变化：空白对照组大鼠动脉内膜相对完整、光滑，平滑肌细胞及弹力膜结构排列规则，平滑肌细胞未见明显变性；糖尿病组大鼠动脉内膜增厚，内皮细胞排列不完整，大部分内皮细胞缺失，部分平滑肌细胞变性、坏死，炎细胞浸润；抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组大鼠的动脉内膜相对光滑，内皮细胞局部缺失，平滑肌细胞及弹力膜结构排列规则；抵挡汤中、晚期干预组和二甲双胍组动脉内膜不完整，部分内皮细胞缺失，平滑肌细胞及弹力膜排列紊乱，伴少量平滑肌细胞变性、坏死。　　（3）空白对照组的电镜结果显示内皮细胞完整，形成的紧密连接连续、致密，宽度在30-40nm之间，平滑肌细胞完整；糖尿病组内皮细胞很薄不连续，细胞轮廓变的不清楚，弹力膜厚度不一且不均匀，平滑肌细胞线粒体肿胀；抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组细胞间连接较糖尿病组连续、致密，弹力膜增厚，平滑肌细胞正常；抵挡汤中、晚期干预组，二甲双胍组内皮细胞增厚，弹力膜厚度不一，平滑肌细胞完整。　　结论：　　抵挡汤早期干预可以调节血管内皮通透性改变，减轻血管内皮细胞损伤，增强血管内皮的防御功能，从而延缓糖尿病大血管病变的发生与发展。其机制可能为：抵挡汤早期干预可以提高cAMP、PKA的表达，降低PKC、MLCK的表达，从而调控MLCK信号通路，介导血管内皮细胞通透性改变，保护血管内皮细胞。