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2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-ME)是一种甾体激素类化合物，属新型激素类抗肿瘤药物，对快速生长的肿瘤细胞具有相对较高的特异性，且不会对骨髓和造血器官产生毒性。由于2-ME是一种难溶性药物，胃肠道吸收差，血浆消除率快，生物利用度低等特点，限制了其在临床上的开发应用。因此本文以牛血清白蛋白(BSA)作为药物载体，小分子叶酸(FA)作为靶向因子，抗肿瘤药物2-甲氧基雌二醇(2-ME)作为模型药物，构建成以叶酸受体介导的2-ME白蛋白纳米粒肿瘤靶向给药系统(2-ME-FA-BSANPs)，旨在提高2-ME的水溶性和生物利用度，减少给药剂量，降低药物毒副作用。1.2-ME-FA-BSANPs的制备及相关性质的考察。首先采用去溶剂化-化学交联法制备2-ME白蛋白纳米粒(2-ME-BSANPs)，通过单因素考察白蛋白浓度、2-ME浓度、交联剂戊二醛用量、乙醇与水比例、溶液pH等条件，确定了2-ME-BSANPs制备工艺为：BSA浓度为40mg/ml；2-ME浓度为4mg/ml；溶液pH值为10.0；乙醇与水的比例为3:1。进一步利用叶酸活性酯与白蛋白纳米粒表面活性氨基进行偶联反应，制备叶酸偶联的2-ME白蛋白纳米粒靶向给药系统(2-ME-FA-BSANPs)，使其具有主动靶向作用，并提高白蛋白纳米粒的肿瘤细胞摄取率。测定2-ME-FA-BSANPs平均粒径和电位分别为(217.5±5.1) nm和(-37.59±1.39) mV；平均包封率与载药量分别为(82.50±5.80)%和(7.50±0.50)%；扫描电镜图显示:2-ME-FA-BSANPs粒径分布均匀，呈球形且表面光滑；体外释药结果显示：原料药2-ME释放较快，在12h内累积释放量达85%左右；相对应的2-ME-FA-BSANPs释放缓慢平稳，在96h内累积释放量达85%左右，表明靶向给药系统具有一定的缓释特性；将靶向制剂制备成冻干粉，经筛选选择3%的蔗糖作为其冻干保护剂；考察稳定性结果显示：在4℃和室温条件下冻干粉可稳定保存6个月，表明该靶向制剂具有较好的稳定性。2.2-ME-FA-BSANPs体外抗肿瘤活性与靶向性的研究。采用MTT法考察靶向给药系统对SMMC-7721肿瘤细胞存活率的影响。在2-ME-FA-BSANPs作用时间24h、48h和72h，最大浓度为40μmol/l时，对应的肿瘤细胞抑制率分别为50.58%、68.53%和75.00%，相同条件下2-ME组的肿瘤细胞抑制率分别为25.28%、30.31%和35.37%，结果表明在不同时间、不同浓度作用下，2-ME-FA-BSANPs组对肿瘤细胞的抑制率均高于2-ME组(P<0.05)。采用荧光显微镜法与细胞流式分析法考察2-ME-BSANPs和2-ME-FA-BSANPs的靶向性。结果显示：相比于2-ME-BSANPs组，2-ME-FA-BSANPs组的荧光强度明显增强，且在作用4h时2-ME-FA-BSANPs组进入细胞内的比例为99.8%，表明靶向给药系统在叶酸介导作用下可以有效、快速的进入肿瘤细胞内部，对肿瘤细胞具有较高的靶向作用；细胞周期研究结果表明所制备靶向给药系统主要将SMMC-7721肿瘤细胞阻滞在G2/M期，且不改变原料药2-ME的作用机制；细胞凋亡研究结果表明，与2-ME组相比，靶向给药系统2-ME-FA-BASNPs能诱导更多肿瘤细胞发生凋亡。3.2-ME-FA-BSANPs体内药代动力学的研究。本研究以Sprague-Dawle(SD)大鼠为动物模型，采用HPLC法测定2-ME在大鼠血浆中的浓度，研究靶向给药系统的体内药代动力学特征。结果显示，2-ME-FA-BSANPs和2-ME组的消除半衰期t1/2β分别为：(124.61±12.00) min和(22.17±6.00) min；两组平均滞留时间MRT分别为(181.03±5.20) min和(22.66±2.54)min；两组AUC分别为(290.53±10.10)(μg/ml) min和(112.99±5.50)(μg/ml) min。结果表明，2-ME-FA-BSANPs靶向给药系统的消除半衰期、平均滞留时间与AUC均显著高于2-ME组(P<0.05)，显著改善药物2-ME半衰期短，生物利用度低等缺点，达到了提高药物疗效，降低毒副作用的目的。