目的:复方清肝无糖颗粒是从广西民间挖掘并在中医临床上应用了多年治疗酒精性肝损伤的经验方,该方由葛根、红参、当归等五味药材组成。本课题是在临床汤剂及前期研究的基础上,经过处方分析、剂型筛选,将复方清肝汤剂改成无糖颗粒剂,并应用现代制剂研究技术,对其制备工艺、质量标准、初步稳定性及抗肝损伤药效等方面进行了研究,以期开发成有效、稳定、方便的新制剂。方法:(1)提取与纯化工艺研究:采用单因素试验法与星点设计-效应面试验法,以葛根素含量及干膏率作为评价指标,对提取工艺中提取时间、加水倍数与纯化工艺中相对密度、醇沉浓度以及醇沉时间等因素进行筛选,以确定最佳提取与纯化工艺参数。(2)成型工艺研究:采用单因素试验法与星点设计-效应面试验法,以制粒情况、溶化性、含水量、流动性、粒度以及吸湿性为评价指标,对辅料种类、用量以及干燥温度等进行筛选,以确定最佳成型工艺条件。(3)制剂质量标准研究:根据《中国药典》2015年版四部“制剂通则”的颗粒剂项下的要求,采用薄层色谱法对制剂中葛根、红参、当归、槐花、枸杞等药材成分进行定性鉴别;对性状、粒度、水分、溶化性、装量差异以及溶出度等进行检查;采用HPLC法对处方中葛根素、人参皂苷等主要有效成分进行含量测定,并规定其含量限度,为本制剂的质量控制提供可行、可靠的方法。(4)制剂稳定性研究:按照《中国药典》2015年版四部的规定,对复方清肝无糖颗粒进行影响因素试验、加速试验和长期试验,考察制剂稳定性。(5)制剂药效学初步研究:采用酒精诱导小鼠肝损伤的模型,考察复方清肝无糖颗粒对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。结果:(1)确定了复方清肝无糖颗粒的提取与纯化工艺。其最佳提取与纯化工艺为:按处方称取药材,加入11倍量水,浸泡2小时,煎煮2次,每次煎煮100分钟,合并滤液,浓缩至相对密度为1.10(25℃),加乙醇至含醇量(体积分数)为72%,醇沉(4℃)36小时,滤过,回收乙醇,备用。(2)确定了复方清肝无糖颗粒的成型工艺。其最佳成型工艺为:按照第一部分中“2.3”项下确定的最佳提取与纯化工艺条件制备浸膏,将所得浸膏(含红参细粉)与3倍量稀释剂(糊精:乳糖=0.8:1)混合均匀,喷洒75%乙醇溶液制软材,过14目筛制粒,65℃干燥约1小时,过14目筛整粒,分装,即得。(3)建立制剂质量标准(草案)。采用薄层色谱法对制剂中药材成分进行定性鉴别,所得色谱图斑点清晰;对颗粒的性状、粒度、水分、溶化性、装量差异以及溶出度等进行检查,结果符合相关规定;采用高效液相色谱法对葛根素、人参皂苷等成分进行定量分析,方法可靠,稳定可行。(4)复方清肝无糖颗粒稳定性良好。在六个月试验期间,复方清肝无糖颗粒在性状、鉴别、检查以及含量等方面均无明显变化,符合相关规定。(5)复方清肝无糖颗粒的低、中、高剂量均能明显降低小鼠的ALT、AST、GT、MDA值,其中高、中剂量较为显著,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在肝脏病理学方面,与模型组比较,各给药组的肝脏病理损伤均有所减轻。结论:(1)复方清肝无糖颗粒的提取纯化工艺和成型工艺安全可靠,重复性良好。(2)制剂的质量标准(草案)可行,质量可控,并且定性、定量分析分离度好、灵敏度高、重现性好,各项检查符合相关规定。(3)制剂的初步稳定性良好,为制剂的实际生产的可行性提供理论依据。(4)复方清肝无糖颗粒对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用。