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石斛属(Dendrobium)为兰科第二大属,全球分布1600多个种,我国有74个种及2个变种。我国石斛植物中近40种可作药用,其中铁皮石斛(DendrobiumoffinaleKimura et Migo)更是誉为“上药”,极具药用价值和经济价值。 本文以从福建、广西、浙江采集的铁皮石斛和广西采集的粉花石斛(Dendrobium loddigesii Kolfe)分离到的78个铁皮石斛内生细菌菌株和8个粉花石斛内生细菌菌株为实验对象,通过测定这些菌株解磷、固氮和产生长素IAA的能力,分析其促生相关特性。结果显示有47株细菌能溶解有机磷,40株细菌能溶解无机磷,31个菌株能同时溶解有机磷和无机磷;24株细菌能固氮;19株细菌能产IAA。随后,我们对24个固氮菌株和1个IAA产量最大的菌株进行了多样性分析,ARDRA结果表明在相似度80%的条件下,25个菌株被划分成10簇;经过16SrRNA基因测序和比对,这些菌属于节杆菌属(Arthrobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、假单胞菌属(Pseudomonas)以及巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)。 同时,我们将这25个菌株制成菌液浇灌在白菜[Beassica pekinensis(Lour.)Rupr.]根部,统计其促生结果。结果显示,24个石斛内生菌菌株对白菜的根长和株高没有影响,9个菌株(DoB10、DoB20、DoB25、DoB35、DoB43、DoB45、DoB49、DoB58、DoB65)对其处理白菜的鲜重、干重都表现出促进作用,内生菌处理白菜的生物量增幅从93.30%-153.19%不等。 而后我们又选取3个对白菜生长促进作用显著的菌株(DoB20、DoB25和DoB49)以及1个利福平标记菌株DoB49rif再次进行的促生实验,同时测定DoB49rif定殖量。实验结果显示,3个菌(DoB25、DoB49和DoB49rif)对白菜的株高均有明显的促进作用,但是只有菌株DoB49rif对白菜的根长有促进作用;菌株DoB49rif对白菜鲜重的增加量最高,为168.04%,但其定殖在根围的数量随着时间的递增呈对数递减。 生理测定的结果表明,菌液处理的白菜蛋白质和叶绿素含量相较于对照没有显著差别。DoB20和DoB49促进白菜碳水化合物含量增加,其中DoB49促进作用最为显著,处理组蔗糖增幅达129.49%;内生菌处理组Vc含量也普遍增加,其中DoB20、DoB49rif对白菜Vc含量的促进最为显著,分别为110.19%、119.65%。 鉴于DoB49及其突变体菌株DoB49rif促生作用优异,我们又选取这两个菌株进行促生实验,发现菌株处理组白菜的鲜重和干重比对照组有显著的增加,生物量增加分别达35.87%、66.01%,并且内生菌还延迟了白菜的抽苔和开花。