姜黄油降血脂与抗肿瘤活性研究

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[目的]传统中医药在心血管系统疾病和肿瘤治疗中具有重要地位。从中草药和天然药物中提取有效成分并探究其抗心血管疾病及抗肿瘤的作用与机理已逐渐成为药理学研究的热点之一。从姜科植物姜黄中提取的挥发油类成分——姜黄油(Turmeric oil)具有多种药理活性,且无毒副作用,是具有广阔开发前景的天然活性成分。本课题旨在研究姜黄油抗高脂血症与抗肝癌的作用,并初步探讨了其可能的作用机理。[方法]本论文第一部分建立大鼠高脂血症模型并给予姜黄油治疗。通过测定大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C等生化指标、计算大鼠脏器指数并对肝脏进行组织病理学检查,以明确姜黄油的降血脂作用及对多种脏器的保护作用。本论文第二部分对姜黄油对肝癌细胞的增殖与凋亡的影响进行了研究。以人肝癌细胞株Bel-7402、SMMC-7721和HepG2为研究对象,运用MTT法检测药物对癌细胞生长的抑制率,以确定对姜黄油作用最敏感的细胞株进行进一步机制研究。然后利用流式细胞术、Western blot方法检测姜黄油诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡的作用及线粒体凋亡通路相关蛋白的表达。在此基础上以小鼠肝癌模型对姜黄油的抗肿瘤活性进行体内评价与验证。[结果]姜黄油抗高血脂症的实验结果如下:(1)姜黄油能有效降低高脂血症模型大鼠血清TC、TG、LDL的水平,且高剂量姜黄油在降低TC、LDL方面强于阳性药血脂康,降低TG水平与阳性药相当。姜黄油的降脂作用呈现一定的剂量相关性。(2)姜黄油能够恢复大鼠的肾脏和心脏重量,肝脏和附睾处脂肪重量也均有所恢复,表明姜黄油均能在一定程度上缓解高脂血症导致的脏器损伤。姜黄油的这一治疗作用也具有一定的剂量依赖性。(3)姜黄油能够减少肝脏脂肪沉积,改善高脂血症大鼠的肝脏脂肪变性。姜黄油抗肝癌作用的实验结果如下:(1)姜黄油可以不同程度地抑制人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、SMMC-7721增殖,具有剂量及时间依赖性。其中,姜黄油对Bel-7402细胞抑制活性最强,因此选择该细胞株作为进一步研究对象。(2)姜黄油可以剂量依赖性地促进Bel-7402细胞株发生凋亡。(3)姜黄油可以剂量依赖性地降低Bel-7402细胞株的线粒体膜电位,升高胞内Bax/Bcl-2比值,促进细胞色素C从线粒体释放入胞浆,并激活caspase-9和caspase-3,进而诱导细胞凋亡。(4)姜黄油可以剂量依赖性地抑制肿瘤生长,破坏肿瘤组织,但对肝指数、脾指数和胸腺指数影响不大。姜黄油还下调肿瘤组织中Bcl-2表达,上调Bax和cleaved-caspase-3的表达。[结论](1)姜黄油具有显著的降血脂作用,可以改善实验性高脂血症及其导致的脏器损伤,是一种具有良好降血脂效果的药用植物提取物。(2)姜黄油体内、体外均对肝癌细胞有抑制增殖作用,体内不影响免疫功能,并且能通过激活线粒体凋亡通路及caspase级联反应诱导肝癌细胞发生凋亡。这可能是姜黄油抗肿瘤作用的机理之一。(3)本论文的研究为将姜黄油开发为高效低毒的天然降血脂、抗肿瘤药物提供实验依据。
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