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目的急性脊髓损伤是外科中常见的损伤,后果严重且恢复困难。急性脊髓损伤分为原发性损伤和继发性损伤,脊髓继发性损伤扩大了损伤范围,加重了损伤程度,是脊髓损伤后影响脊髓修复的重要病理过程。脊髓继发性损伤的过程十分复杂,包括炎症反应、自由基蓄积、细胞凋亡加快等一系列生化反应,其中细胞内外环境的改变会导致各种酶类的激活,对组织造成进一步的损害。大鼠急性脊髓损伤后,神经细胞的死亡方式包括坏死和凋亡。该实验通过建立大鼠急性脊髓损伤模型,应用免疫组化技术检测不同时间点Caspase-3、AIF、Cathepsin B的表达情况,并初步探讨三者在脊髓损伤后表达的意义。方法取健康成熟SD大鼠78只,雌雄不限,体重220-250g,由中国医科大学实验动物中心提供。随机分为：损伤组：脊髓损伤后分2、8 h, 1、3、5、7 d共6个时间点,每个时间点6只；假手术组：单纯椎板切除术后2、8 h,1、3、5、7 d共6个时间点,每个时间点6只；空白对照组6只,不做任何处理。HE染色观察脊髓组织病理学变化,免疫组化测定各时间点Caspase-3、AIF、Cathepsin B的表达变化,原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平。统计学上采用SPSS11.5软件包进行统计,各组数据采用x±s表示,Cathepsin B、Caspase-3阳性细胞数及神经细胞凋亡细胞数各组比较采用方差分析。以P<0.05为有差异,P<0.01为有显著性差异。结果光镜下观察可见正常和假手术组神经元结构形态规则,白质致密。损伤后2 h,损伤段灰质出现明显出血灶。损伤后8 h,出血灶较2 h减少,开始出现一些炎性细胞。1-3 d脊髓破坏严重,白质松散不规则,3 d时损伤区域有扩大趋势,损伤区出现大量炎性细胞浸润,5-7 d损伤区域未有明显改变,仍有大量炎性细胞浸润。正常及假手术组大鼠脊髓神经细胞Caspase-3, AIF, Cathepsin B, TUNEL阳性细胞较少；在脊髓损伤后3 d,Cathepsin B阳性细胞数明显增多,5 d达高峰,7 d未见明显衰减。脊髓损伤后1 d,AIF阳性细胞数明显增多,5 d表达减弱。Caspase-3阳性细胞数在脊髓损伤后8 h明显增多,3 d达高峰,7 d表达减弱。TUNEL阳性细胞数也在8 h明显增多,3 d达高峰,7 d表达减弱。Cathepsin B阳性细胞形态及表达的部位均与Caspase-3阳性细胞、TUNEL阳性细胞差别较大。结论大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3和AIF均参与了神经细胞的凋亡调节,Cathepsin B在急性脊髓损伤后以炎性细胞为媒介参与了脊髓继发性损伤。