目的：探讨左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤的影响及机制。　　 方法：选用8周龄听力正常雄性大鼠48只，体重200±20g，随机分为空白组、模型组、左归丸组、SP600125组，每组12只。适应性饲养1周后。空白组腹腔注射生理盐水，并给予生理盐水灌胃;模型组腹腔注射硫酸庆大霉素，并给予生理盐水灌胃;左归丸组腹腔注射硫酸庆大霉素并给予左归丸灌胃;SP600125组每日腹腔注射硫酸庆大霉素，间隔两小时后腹腔注射SP600125溶液，连续10日，每日根据体重调整剂量。造模前行ABR检测，选取听力正常大鼠造模;在给药后第十一天对大鼠行ABR阈值检测，并留取尿标本检测NAG酶，眼眶取血检测Scr、BUN，留取耳肾组织标本进行病理分析及免疫组化和蛋白免疫印迹检测ASK1/MKK4表达情况，采用SPSS19.0统计软件对结果进行统计分析。　　 结果：　　 1.大鼠BUN、Scr、NAG酶的比较，模型组BUN、Scr、NAG酶与其他三组相比明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，左归丸组、SP600125组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 2.大鼠听性脑干反应(ABR)阈值比较，造模前各组大鼠ABR阈值正常，无明显差异，具有可比性;模型组ABR阈值与其他三组相比模型组听力下降明显，具有统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，空白组听力明显优于左归丸组、SP600125组，具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 3.肾脏病理切片光镜下观察，空白组大鼠肾小管生理结构基本完整，小管间排列紧密有序;模型组大鼠近曲肾小管上皮细胞明显肿胀、胞浆疏松，可见大面积片状坏死及脱落，部分上皮细胞呈空泡变性，管腔内可见较多的细胞碎片和颗粒管型，间质中有大量的炎性细胞浸润，间质纤维组织增生明显，细胞外基质增多，间质明显增宽。左归丸组、SP600125组病理变化比模型组明显减轻，近曲肾小管上皮细胞轻度肿胀，可见少许上皮细胞坏死脱落，细胞间质可见少量炎性细胞浸润，细胞外基质轻度增多，间质增宽不明显。　　 4.耳蜗病理切片光镜下观察，空白组中耳蜗毛细胞成三排排列、排列整齐、形态规整，模型组耳蜗毛细胞形态不规整、排列紊乱、大小不一、可见细胞缺失，左归丸组和SP600125组毛细胞排列欠整齐、形态尚整齐。　　 5.ASK1/MKK4在肾组织中的表达比较运用免疫组织化学法，空白组ASK1/MKK4表达量极少，模型组、左归丸组、SP600125组ASK1表达于肾小管上皮细胞胞浆，呈棕黄色，平均光密度的比较，模型组与其他三组相比，模型组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，左归丸组、SP600125组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 运用免疫蛋白印迹法，ASK1/MKK4在灰度值上，模型组与其他三组相比，模型组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，左归丸组、SP600125组灰度值明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 6.ASK1/MKK4在耳蜗组织的表达比较运用免疫组织化学法，观察到ASK1/MKK4主要表达于螺旋神经节细胞的胞浆中，呈棕黄色。空白组胞浆染色浅，模型组胞浆染色深。平均光密度的比较，模型组与其他三组相比，模型组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，左归丸组、SP600125组平均光密度明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 运用免疫印迹法，ASK1/MKK4在灰度值上，模型组与空白组、左归丸组、SP600125组相比，模型组明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);空白组与左归丸组、SP600125组比较，左归丸组、SP600125组灰度值明显升高具有显著统计学意义(P＜0.01);左归丸组与SP600125组相比不具有统计学意义(P＞0.05)。　　 7.ASK1/MKK4在耳肾之间的相关性分析。免疫组化中，ASK1蛋白在耳、肾组织中表达的平均光密度具有相关性，相关系数为0.68，呈正相关，具有显著统计学意义(P＜0.01)，MKK4蛋白在耳肾组织中的表达具有相关性，相关系数0.76，呈正相关，具有显著统计学意义(P＜0.01);免疫印迹中，ASK1蛋白在耳、肾组织中表达的灰度值也具有相关性，相关系数为0.89，呈正相关，具有显著统计学意义(P＜0.01)，MKK4蛋白在耳肾组织中的表达具有相关性，相关系数0.73，呈正相关，具有显著统计学意义(P＜0.01)。　　 结论：　　 1.腹腔注射庆大霉素10天后，大鼠尿NAG酶、BUN、Scr出现明显的上升，大鼠听力也出现不同程度的下降，表明庆大霉素诱导的耳肾损伤模型制作成功。　　 2.左归丸可降低庆大霉素诱导的耳肾损伤模型的ABR阈值、BUN、Scr、NAG酶，可以改善耳肾功能，在一定程度上保护耳组织和肾脏。　　 3.左归丸可降低庆大霉素诱导的耳肾损伤模型的ASK1/MKK4的表达，提示左归丸降低庆大霉素诱导的耳肾损伤可能是通过抑制ASK1/MKK4的表达，保护耳肾组织。　　 4.ASK1/MKK4蛋白在耳肾组织中的表达有相关性，可以认为ASK1/MKK4可能是中医“肾开窍于耳”的物质基础之一。