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【目的】：探讨体外分离、培养人前软骨干细胞(PSCs)的可行性，分析其表型特点；研究脉冲电磁场对免疫磁性细胞分选的人前软骨干细胞(PSCs)增殖的生物学影响；构建猿肾病毒40大T抗原基因(SV40Tag)介导的永生化人前软骨干细胞株，为下一步基因打靶研究其分化分子机制提供稳定的细胞来源。【方法】：①采用酶消化法从流产胎儿干骺端中收集细胞，用免疫磁性分选技术分离出前软骨干细胞，体外扩增培养，用流式细胞术、免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定纯化后的PSCs；②采用50 Hz、1 mT脉冲电磁场间断刺激细胞，绘制细胞生长曲线，MTT法测定细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的情况；③采用脂质体介导的基因转染技术将含有SV40Tag的质粒pCMVSV40T／PUR转染人前软骨干细胞(PSCs)，经嘌呤霉素筛选，阳性克隆扩大培养并连续传代。用免疫组化、RT-PCR、Southern印迹杂交法对转染细胞进行鉴定，并检测SV40Tag在转染细胞中的表达及跟基因组的整合情况。【结果】：①从流产胎儿干骺端中成功培养出人前软骨干细胞，细胞表面表达成纤维生长因子受体-3(FGFR-3)标记物；②脉冲电磁场刺激4 d和6 d能明显促进细胞的增殖(P＜0．05)，实验组S期细胞百分比增高(P＜0．01)，实验组细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均明显降低(P＜0．05)；③脂质体转染后筛选获得的阳性克隆扩大培养，命名为永生化前软骨干细胞(IPSCs)，能连续传代培养，细胞生长迅速。免疫组化和RT-PCR证实IPSCs成纤维生长因子受体-3(FGFR-3)阳性，并可检测到SV40Tag mRNA及其蛋白的表达。Southern印迹杂交显示IPSCs基因组中存在SV40Tag cDNA。【结论】：在体外培养条件下可以从流产胎儿干骺端中分离培养出较高丰度的前软骨干细胞；成功的构建了SV40Tag介导的永生化人前软骨干细胞株。