目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)体外增殖性感染胎鼠大脑皮质细胞，初步探讨HCMV跨种属感染的分子机制。为临床研究HCMV中枢神经系统感染提供实验依据。方法将本实验室纯化后的HCMV AD169株通过空斑形成试验(plaque forming unit，PFU)测定病毒感染性。以4×10~5 PFU／ml病毒感染量接种至Balb／c胎鼠的大脑皮质细胞和人胚肺成纤维细胞(human embryo lung cell，HEL)，在感染后的第1、3、5和7天分别收集细胞培养物及其上清，用不同的方法检测如下指标：(1)HCMV接种后，通过倒置显微镜逐日观察HCMV致胎鼠大脑皮质细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)，并观察其病变特征；(2)通过PCR和RT-PCR方法检测胎鼠大脑皮质细胞中与HCMV复制增殖的重要基因IE、UL83和UL54 DNA和mRNA；同时，以β-actin为内参，研究其mRNA含量的变化特征及趋势；(3)通过空斑形成试验检测HCMV感染胎鼠大脑皮质细胞病变效应达到+++～++++时感染性病毒数量；(4)通过透射电镜观察HCMV感染后胎鼠大脑皮质细胞胞内的病毒颗粒及其超微结构的变化。结果(1)将HCMV AD169毒株以4×10~5 PFU／ml接种至胎鼠大脑皮质细胞2天后，出现病毒致细胞病变效应(CPE)，可见少数神经元和胶质细胞细胞肿胀、变圆，胞内颗粒增多，折光性增强等病变。在第3、5和7天时，细胞病变数量逐渐增加，病变程度逐步加重，表现为轴突断裂、细胞溶解甚至脱落等情况。而接种病毒的HEL则在第1天就出现CPE，且随着时间的延长，细胞病变数目增多，病变加重，表现为细胞肿胀、变圆、折光性增强、脱落等情况。相对来说，HCMV对HEL更为敏感、CPE出现早、细胞病变程度重；(2)HCMV接种至胎鼠大脑皮质细胞的第1、3、5和7天，PCR检测到细胞培养物HCMV IE、UL83和UL54 DNA均呈阳性；同时，以β-actin为内参，RT—PCR检测各时间点mRNA，结果表明：各时间点均可检测到HCMV IE、UL83和UL54 mRNA，产物大小分别为872bp、842bp和784bp，经Bioscience image anlysis system进行灰度值分析显示，随着HCMV感染胎鼠大脑皮质细胞时间的延长，HCMV IE、UL83和UL54 mRNA表达量均明显增加，证实HCMV在胎鼠大脑皮质细胞内为增殖性感染；(3)采用空斑形成实验结果表明：约在第7天，接种病毒悬液的HEL细胞层出现圆形空斑，随着感染天数的增加，空斑变大，数目增多。约14天空斑基本不在发生变化，根据公式计算得到病毒感染量为3.8×10~5PFU／ml。(4)透射电镜可见感染后的胎鼠大脑皮质细胞构筑破坏严重，细胞器均有不同程度损伤，并在胞核内出现病毒核酸、胞质内出现疱疹样病毒颗粒。结论HCMV AD169株具有感染体外培养的胎鼠大脑皮质细胞的能力，证实了HCMV可以跨种属感染，为临床研究HCMV中枢神经系统感染提供了实践依据。