紫竹(Phyllostachys nigra(Lodd.ex Lindl.)Munro),属于禾本科竹亚科刚竹属植物,主要分布于江苏、浙江、安徽、湖北、福建及陕西等地。《草木便方》、《重庆草药》中均记载了紫竹根有祛风除湿、活血解毒之功效。据报道,紫竹中含有水溶性多糖、黄酮类、内酯、酚酸、挥发油类和其他活性物质,有抑制凋亡和舒张血管的作用。但目前为止,极少有试验研究紫竹根的抗病毒和抗氧化活性。所以本试验对紫竹根水提物的抗病毒和抗氧化效果进行了研究。试验Ⅰ紫竹根水提物的制备和安全性评估用煎煮法制备紫竹根的水提液,经冷冻干燥后得到紫竹根水提物(PNR)。为评估紫竹根水提物的安全性,分别进行急性毒性试验和亚慢性毒性试验。结果显示,在急性毒性试验中,每次给药后0.5小时内,小鼠有轻微不良反应,如食欲减退,之后很快恢复正常,小鼠死亡率为零;LD50>5000 mg/kg,属于实际无毒级。在亚慢性毒性试验中,实验前期高剂量组(2000 mg/kg bw)小鼠体重与对照组之间差异不显著,但显著低于中(200 mg/kg bw)、低(20 mg/kg bw)剂量组;中剂量组白细胞总数高于对照组,而淋巴细胞显著低于对照组;每组的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、甘油三酸酯和尿素氮无显著差异;剖检和病理检查未见明显异常。这些结果表明,紫竹根水提物没有急性或亚慢性毒性,可以应用于临床。试验Ⅱ紫竹根水提物体外抑制水疱口炎病毒增殖的研究用MTT法测定紫竹根水提物和对Vero细胞的安全浓度。采用三种不同的加药方式,用MTT法测定不同浓度紫竹根水提物经水疱口炎病毒(VSV)侵染后的细胞保护率。通过空斑减数试验测定紫竹根水提物的病毒抑制率,并由Real-time PCR技术,探究紫竹根水提物对VSV增殖的抑制作用。病毒灵为阳性对照。结果显示,PNR对Vero细胞的安全浓度为500μg/mL;三种方式都使细胞保护率上升,第一种的给药作用有更好的细胞保护作用。按照先加药再接种病毒、病毒和药同时加入和先接种病毒后加药的顺序,得到的IC50依次为 511.8 μg/mL、38.6 μg/mL、28.5 μg/mL,SI 为 3.3、12.0、58.9。空斑减数试验得到结果与细胞保护率试验结果一致。PNR能有效抑制VSV-G基因的扩增,从而抑制VSV的增殖。试验Ⅲ紫竹根水提物体内抗VSV病毒的研究选取雄性ICR小鼠60只,随机分成6组,每组10只。正常组,病毒对照组,病毒灵组(阳性对照),PNR低、中、高浓度组。除正常组用生理盐水处理,其余5组小鼠用滴鼻法每只感染0.01 mL的1.4×105 TCID50的VSV病毒。两小时后,病毒灵组小鼠按照0.09g/kgbw的剂量灌胃病毒灵液,低、中、高剂量组小鼠按照0.1 g/kg bw、0.2 g/kg bw、0.4 g/kg bw剂量灌胃PNR。病毒对照组和正常组小鼠用生理盐水处理。每天记录小鼠的生理状况和体重。每只小鼠每天灌胃一次,连续6天。小鼠处死后分离肺、脑、脾组织,固定,H.E.染色,并进行脑组织中IFN-α,IFN-γ和Mx2的表达分析。结果显示,PNR显著增加VSV感染后小鼠的体重,减轻肺、脑、脾组织的损伤,并呈现剂量依赖性。PNR能显著促进抗病毒蛋白IFN-α,IFN-γ和Mx2的分泌。试验Ⅳ紫竹根水提物的体外抗氧化研究对紫竹根水提物进行DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力和总还原力的测定。VC作为阳性对照结果表明,紫竹根水提物具有良好的抗氧化能力。特别是在清除超氧阴离子的试验中,紫竹根水提物和Vc的IC50值分别为31.96±0.27 μg/mL和39.32±1.19 μg/mL.而在清除DPPH自由基、清除羟自由基和总还原力的试验中,PNR的IC50分别为83.34±3.20μg/mL、237.82±0.95μg/mL和 169.25±3.98 μg/mL,而 Vc 的 IC50分别为 19.58±0.18 μg/mL、153.46±0.22 μg/mL 和 103.64±5.21 μg/mL。