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背景:三阴乳腺癌（Triple-negative breast cancer,TNBC）是一种预后相对较差的乳腺癌,不但对常见的内分泌治疗不敏感,而且缺乏有效的治疗靶点。TNBC的主要辅助治疗手段为化疗,但易出现耐药而导致治疗失败。因此,筛选和鉴定出TNBC的新治疗靶点,深入研究其发生、发展的分子机制具有重要的临床和科研价值。新近发现TNBC患者PD-L1程序性死亡配体1（Programmed death-ligand 1,PD-L1）的表达率高于其它分子亚型的乳腺癌;程序性死亡受体1（Programmed cell death protein 1,PD-1）与PD-L1相结合,抑制肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor infiltrating lymphocytes,TILs）的激活,可以使TNBC细胞通过免疫逃逸而存活。因此,抗PD-1/PD-L1的免疫检查点抑制剂（Immune checkpoint inhibitors,ICIs）治疗是目前TNBC具有广阔应用前景的研究热点之一,但是患者对其的治疗反应存在异质性,对PD-1/PD-L1的调控机制有待深入研究。目前研究发现表观遗传学在肿瘤的免疫治疗中发挥着重要的作用,N6甲基腺苷mRNA修饰（m6A）是一种最丰富的RNA修饰,通常在5′UTR附近富集,可以调节细胞增殖、迁移和凋亡并参与癌症进展,其中甲基转移酶样3（METTL3）是m6A修饰重要的组成部分。METTL3修饰可能在PD-1/PD-L1的免疫逃逸中,通过增强肿瘤细胞存活而发挥重要作用,从而可能成为免疫治疗的潜在靶点,但是目前尚缺乏相关研究。目的:1.探究m6A修饰在三阴性乳腺癌中的作用;2.探究三阴性乳腺癌中METTL3与c-myc、PD-L1之间的调控关系及机制;3.探究c-myc及其抑制剂在三阴性乳腺癌中的作用。方法:1.通过生物信息学分析m6A相关分子对三阴性乳腺癌患者预后的影响。在三阴性乳腺癌细胞系（MDA-MB-231）中构建METTL3沉默以及稳定过表达细胞株,通过q-PCR以及Western Blotting明确感染效率。并通过细胞增殖、克隆形成、Transwell迁移实验、划痕实验、流式细胞周期实验以及动物实验明确METTL3对三阴性乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移以及细胞周期的调控作用。2.通过生物信息学技术分析三阴性乳腺癌中METTL3和PD-L1、METTL3和c-myc、c-myc和PD-L1的相关性。通过q-PCR以及Western Blotting实验对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中METTL3、c-myc和PD-L1的调控关系进行验证探究。3.通过细胞增殖、克隆形成、Transwell迁移实验、划痕实验、流式细胞周期实验探究c-myc及其抑制剂对三阴性乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移以及细胞周期的调控作用。4.通过Western Blotting实验以及m6A-IP-qPCR实验验证METTL3以m6A-FBXW7方式调控c-myc。结果:1.METTL3高表达与三阴性乳腺癌患者的良好预后相关;METTL3低表达的三阴性乳腺癌细胞株增殖、克隆形成、迁移能力上升;反之,METTL3高表达的三阴性乳腺癌细胞株增殖、克隆形成、迁移能力下降;动物实验验证高表达METTL3的三阴性乳腺癌细胞株肿瘤形成及增殖能力减弱。2.三阴性乳腺癌细胞株中METTL3通过负向调控c-myc进而负向调控PD-L1的水平;在动物实验和临床样本中也得到了验证。3.c-myc低表达的三阴性乳腺癌细胞株增殖、克隆形成、迁移能力下降;c-myc抑制剂抑制了三阴性乳腺癌细胞株的增殖、克隆形成和迁移能力。4.在三阴性乳腺癌细胞株中,METTL3通过调控FBXW7位点的m6A修饰影响FBXW7的表达,从而负向调控c-myc。结论:在三阴乳腺癌中,低表达的METTL3促进肿瘤细胞的增殖迁移,并通过m6A依赖途径调控FBXW7,进而通过抑制蛋白酶体途径减少了c-myc的降解,稳定c-myc蛋白的表达,最终上调PD-L1的表达水平,增强肿瘤细胞的免疫逃逸;而抑制c-myc的表达不仅会抑制肿瘤细胞的增殖和迁移,还可以下调PD-L1的表达,减轻免疫逃逸。这为TNBC临床治疗的新药物研发或药物应用的临床研究开展提供了理论依据。图56幅,表9个,参考文献86篇